K562-Tax紫杉醇耐藥性細胞的培養說明
一、細胞名稱:K562-Tax紫杉醇耐藥性細胞
二、生長特性:懸浮
三、細胞生長條件:
培養基 90%培養基DMEM
血清 10%FBS
溫度 37℃
空氣條件 5%CO2,95%AIR
凍存條件 培養基50%、血清40%、DMSO10%
四、細胞接收后的操作流程與注意事項
1.細胞收到后建議在培養箱穩定4小時左右再依據細胞密度,換液培養或傳代。
2.如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態,請將懸浮的細胞及時離心,加15%血清的完全培養基到新的培養皿/瓶中繼續培養3天;同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養基,培養2-3天。若3天后細胞都沒有出現增殖而是繼續脫落死亡,請及時聯系實驗室,技術人員會跟進解決。
3.貼壁細胞生長緩慢:適當提高血清濃度(最高不超過20%),或可根據該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養瓶繼續培養。
4.生長不均:貼壁細胞若出現生長不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重新打散細胞,加入新鮮培養基進行培養。
五、細胞常規培養傳代流程(請嚴格遵守無菌操作)
1.吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3ml0.25%EDTA的胰酶消化(注意把握消化時間,通常控制在1~2min)。
2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁運動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml完全培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落、吹散。
3.取出部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的完全培養基,于培養箱中培養。
4.注意培養基PH值變化情況,定期換液,待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。
特別注意:(如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養,建議添加雙抗培養)
1.收到細胞后請盡快更換為含10%FBS的新鮮培養基,不建議使用原瓶中運輸用培養基。
2.細胞任何售后問題,均需拍照存檔并及時聯系客服。
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