影響唾液淀粉酶活性的一些因素
一. 目的
了解溫度對酶活性的影響
了解pH對酶活性的影響
了解激活劑和抑制劑對酶活性的影響
二. 原 理
酶的催化活性受溫度的影響很大。酶反應在低溫時進行較慢,隨著溫度升高而加快,當達到其最適溫度時,酶反應速度最快,以后又隨著溫度升高而減慢,以至完全停止反應。人的唾液淀粉酶活性隨著溫度的升高而升高,直到37℃左右,溫度更高時酶的活性則下降。通常,測定酶的活力時,在酶反應的最適溫度下進行。
應當指出,一種酶的最適溫度不是完全固定的,它與作用的時間長短有關,一般作用時間長,最適溫度低,而作用時間短,則最適溫度高。動物酶的最適溫度一般為35~40℃,而植物酶的最適溫度較高,在40~50℃之間。
酶的活性受環境pH的影響極為顯著。通常,各種酶只有在一定的pH范圍內才表現它的活性。一種酶表現其活性最高時的pH值,稱為該酶的最適pH。低于或高于最適pH時,酶的活性逐漸降低。人的唾液淀粉酶在pH3.8~9.4之間表現其活性,最適pH約為6.8。
不同酶的最適pH值不同。然而,酶的最適pH受底物性質和緩沖液性質的影響。例如,唾液淀粉酶在醋酸緩沖液中的最適pH不是6.8,而為5.6。
酶的活性常常受某些物質的影響,有些物質能使酶的活性增加,稱為酶的激活劑;有些物質能使酶的活性降低,稱為酶的抑制劑。
Cl - 是唾液淀粉酶的激活劑。其它的陰離子,如Br - 、NO 3- 和I - 對該酶也有激活作用,但較微弱。而Cu 2+ 對唾液淀粉酶具有抑制作用。激活劑和抑制劑影響酶活性的劑量是很少的,并且常具有特異性。
在本實驗中,以稀釋的唾液作為淀粉酶液。唾液內的淀粉酶可將淀粉逐步水解成各種不同大小的糊精分子,最終產物為麥芽糖和少量的葡萄糖。它們遇碘呈不同的顏色。直鏈淀粉(即可溶性淀粉)遇碘呈藍色;糊精按分子從大到小的順序,遇碘可呈藍色、紫色、暗褐色和紅色,最小的糊精和麥芽糖遇碘不顯顏色:
由于在不同溫度,不同pH,或者在有激活劑或抑制劑存在的條件下唾液淀粉酶的活性高低不同,則淀粉被水解的程度不同,所以,可由酶反應混合物遇碘所呈現的顏色來判斷,從而可了解上述諸因素對酶活性的影響。但需注意在堿性條件下碘會發生歧化反應,部分碘形成無色的碘酸鹽、次碘酸鹽,此時應增加碘液加入量。
三. 實驗材料及設備
1. 材料
唾液
2. 儀器
恒溫水浴 沸水浴 冰浴
3. 器材
普通試管: 20mL×8
容 量 瓶: 100mL×1
移 液 管: 1mL×4 2mL×3 5mL×1
燒 杯: 250mL×1 50mL×1
溫 度 計: 1
滴 管: 2
洗 耳 球: 2
漏斗、洗瓶、試管架、移液管架、玻棒:各1
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