蛋白質的鑒定與分析
從復雜混合物中純化目標蛋白的方法很多，但制備層析純化最常用。層析類型的選用取決于目標蛋白的理化特性。依據制備或定量分析，選用快速蛋白液相層析或高效液相層析。還可以選擇下列層析或其組合：疏水作用柱層析，離子交換柱層析、分子棑阻層析及親和層析。 如果僅需少量目標蛋白，可采用電泳技術。已知蛋白分子量，就可在電泳膠的相應位置，切割蛋白條帶用于下一步質譜分析。通常 SDS-PAGE提供蛋白分子大小信息。如將等電聚焦膠條上樣于SDS-PAGE，則是二維電泳，它提供蛋白質等電點和分子量信息。二維膠條的分辨率比一維膠條大大提高。 假如目標蛋白含量太少，可使用特異性抗體進行免疫印跡。抗體還可用于分離純化蛋白。由于抗體結合的專一性，大多數最終產品都可以利用目標蛋白的抗體加以純化。利用能結合大多數抗體分子的蛋白A偶聯的或蛋白G偶聯的瓊脂糖凝膠，幾乎所有抗體通過幾輪離心就得到少量純品。酶聯免疫吸附分析(ELISA)技術 是利用抗體的靈敏分析方法。無須純化，ELISA可鑒別并定量目標蛋白。 如果抗體足夠，還可通過免疫組織化學或免疫熒光標記對機體組織及細胞中的目標蛋白進行定位及原位含量測定。 除抗體外，還可使用適配器，即特異性結合靶蛋白的核酸大分子研究目標蛋白。可通過SELEX，即指數富集配基系統進化技術篩選獲得。由于極易化學合成，適配器將來會取代抗體。 近年來，液質聯用越來越廣泛用于靶蛋白鑒定，但質譜僅局限于定性分析。代謝標記在實驗室受控培養條件下可定量。借助痕量靶蛋白的序列信息，代謝標記技術已成為精確可靠的蛋白質分析方法。最近，通過二維樣本的質譜數據集成像或圖譜成像，質譜成像（也稱成像質譜）已成為直接檢測組織或細胞特定區域蛋白質的有效手段。該方法僅憑觀察組織細胞，就能原位探測靶蛋白的有無。也可在復雜情況下快速準確地探測特定生物標志物分子的有無。
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