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中國(guó)微生物菌種

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離心技術(shù)詳解
發(fā)布日期:2022-12-29 09:17:01


離心技術(shù)詳解


基本原理

當(dāng)一個(gè)粒子(生物大分子或細(xì)胞器)在高速旋轉(zhuǎn)下受到離心力作用時(shí),此離心力“F”由下式定義,即:

F = m·a = m·ω2 ·r

a — 粒子旋轉(zhuǎn)的加速度, m — 沉降粒子的有效質(zhì)量,ω—粒子旋轉(zhuǎn)的角速度, r—粒子的旋轉(zhuǎn)半徑( cm )。

通常離心力常用地球引力的倍數(shù)來(lái)表示,因而稱為相對(duì)離心力Relative Centrifugal Force,“ RCF ”。或者用數(shù)字乘“g”來(lái)表示,例如25000×g,則表示相對(duì)離心力為25000。相對(duì)離心力是指在離心場(chǎng)中,作用于顆粒的離心力相當(dāng)于地球重力的倍數(shù),單位是重力加速度“g”(980cm/sec2),此時(shí)“RCF”相對(duì)離心力可用下式計(jì)算:

RCF=ω2r/980
ω=2π×rpm/60

∴ RCF = 1.119×10-5×(rpm)2 r

( rpm — revolutions per minute每分鐘轉(zhuǎn)數(shù),r/min )

由上式可見(jiàn),只要給出旋轉(zhuǎn)半徑r,則RCF和rpm之間可以相互換算。但是由于轉(zhuǎn)頭的形狀及結(jié)構(gòu)的差異,使每臺(tái)離心機(jī)的離心管,從管口至管底的各點(diǎn)與旋轉(zhuǎn)軸之間的距離是不一樣的,所以在計(jì)算是規(guī)定旋轉(zhuǎn)半徑均用平均半徑“rav”代替:

rav=( r min+rmax) / 2

一般情況下,低速離心時(shí)常以轉(zhuǎn)速“rpm”來(lái)表示,高速離心時(shí)則以“g” 表示。計(jì)算顆粒的相對(duì)離心力時(shí),應(yīng)注意離心管與旋轉(zhuǎn)軸中心的距離“r”不同,即沉降顆粒在離心管中所處位置不同,則所受離心力也不同。因此在報(bào)告超離心條件時(shí),通常總是用地心引力的倍數(shù)“×g”代替每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)“rpm”,因?yàn)樗梢哉鎸?shí)地反映顆粒在離心管內(nèi)不同位置的離心力及其動(dòng)態(tài)變化。科技文獻(xiàn)中離心力的數(shù)據(jù)通常是指其平均值(RCFav),即離心管中點(diǎn)的離心力。

為便于進(jìn)行轉(zhuǎn)速和相對(duì)離心力之間的換算,Dole 和Cotzias 利用RCF的計(jì)算公式,制作了轉(zhuǎn)速“rpm”、相對(duì)離心力“RCF”和旋轉(zhuǎn)半徑“r”三者關(guān)系的列線圖,圖式法比公式計(jì)算法方便(見(jiàn)下)。換算時(shí),先在r標(biāo)尺上取已知的半徑和在rpm標(biāo)尺上取已知的離心機(jī)轉(zhuǎn)數(shù),然后將這兩點(diǎn)間劃一條直線,與圖中RCF標(biāo)尺上的交叉點(diǎn)即為相應(yīng)的相對(duì)離心力數(shù)值。注意,若已知的轉(zhuǎn)數(shù)值處于rpm標(biāo)尺的右邊,則應(yīng)讀取RCF標(biāo)尺右邊的數(shù)值,轉(zhuǎn)數(shù)值處于rpm標(biāo)尺左邊,則應(yīng)讀取RCF標(biāo)尺左邊的數(shù)值。



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