藥物敏感性實驗
藥物敏感試驗簡稱藥敏試驗（或耐藥試驗）。旨在了解病原微生物對各種抗生素的敏感（或耐受）程度，以指導臨床合理選用抗生素藥物的微生物學試驗。
一種抗生素如果以很小的劑量便可抑制、殺滅致病菌，則稱該種致病菌對該抗生素“敏感”。反之，則稱為“不敏感”或“耐藥”。為了解致病菌對哪種抗菌素敏感，以合理用藥，減少盲目性，往往應進行藥敏試驗。
其大致方法是：從病人的感染部位采取含致病菌的標本，接種在適當的培養基上，于一定條件下培養；同時將分別沾有一定量各種抗生素的紙片貼在培養基表面（或用不銹鋼圈，內放定量抗生素溶液），培養一定時間后觀察結果。
由于致病菌對各種抗生素的敏感程度不同，在藥物紙片周圍便出現不同大小的抑制病菌生長而形成的“空圈”，稱為抑菌圈。抑菌圈大小與致病菌對各種抗生素的敏感程度成正比關系。于是可以根據試驗結果有針對性地選用抗生素。
近年已有自動化的藥敏試驗儀器問世，使試驗更加迅速、準確。目前濫用抗生素，致使抗藥菌增加，甚至因長期大量使用廣譜抗生素，殺傷體內正常微生物，失去微生物的相互制約作用，從而使一些少見的或一般情況下的非致病菌大量繁殖，引起所謂“二次感染”的情況屢有發生，給治療造成人為的困難。因此，提倡使用藥敏試驗，堅持合理用藥十分重要。
藥物敏感試驗的方法
目前常用的藥敏試驗方法有：紙片瓊脂擴散法（K-B法）、稀釋法、E試驗、檢測細菌耐藥性的方法。稀釋法分液體稀釋法和瓊脂稀釋法。
檢測細菌耐藥性的方法包括耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）的檢測、耐萬古霉素腸球菌（VER）的檢測、耐青霉素肺炎鏈球菌（PRP）的檢測、超廣譜β-內酰胺酶（ESBL）的檢測和β-內酰胺酶的檢測。
1.實驗材料：
1.1普通營養瓊脂培養基：可去生化試劑店購買，做不同細菌的藥敏試驗可選擇不同的培養基，如做大腸桿菌的藥敏試驗可選擇普通營養瓊脂或麥糠凱培養基。做沙門氏菌可選擇血清培養基。
1.2藥敏試紙：購買或自制（詳見實驗準備）
1.3細菌：待做藥敏試驗的細菌
1.4接種環、酒精燈、打孔器、牛津杯
1.5移液器、滴頭
2.實驗準備：
2.1藥敏片的準備：購買或自制
2.1.1藥敏片的制備：取新華1號定性濾紙，用打孔機打成6毫米直徑的圓形小紙片。取圓紙片50片放入清潔干燥的青霉素空瓶中，瓶口以單層牛皮紙包扎。經15磅15-20分鐘高壓消毒后，放在37℃溫箱或烘箱中數天，使完全干燥。
2.2.2抗菌藥紙片制作：在上述含有50片紙片的青霉素瓶內加入藥液0.25毫升，并翻動紙片，使各紙片充分浸透藥液，翻動紙片時不能將紙片搗爛。同時在瓶口上記錄藥物名稱，放37℃溫箱內過夜，干燥后即密蓋，如有條件可真空干燥。切勿受潮，置陰暗干燥處存放，有效期3-6個月。各種常用藥的藥液配制詳。
2.2藥液的制備（用于商品藥的試驗）：按商品藥的使用治療量的比例配制藥液；如商品藥百病消按其說明量治療量0.01%飲水，可按這個比例配制藥液，可取10毫克加入10毫升的水中混勻。此稀釋液即為用于做藥敏試驗的藥液。
3.實驗操作方法
3.1藥敏片法
3.1.1在“超凈臺”中，用經（酒精燈）火焰滅菌的接種環挑取適量細菌培養物，以劃線方式將細菌涂布到平皿培養基上。具體方式；用滅菌接種環取適量細菌分別在平皿邊緣相對四點涂菌，以每點開始劃線涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二點劃線至平皿的1/2，依次劃線，直至細菌均勻密布于平皿。（另：可挑取待試細菌于少量生理鹽水中制成細菌混懸液，用滅菌棉拭子將待檢細菌混懸液涂布于平皿培養基表面。要求涂布均勻致密）
3.1.2將鑷子于酒精燈火焰滅菌后略停，取藥敏片貼到平皿培養基表面。為了使藥敏片與培養基緊密相貼，可用鑷子輕按幾下藥敏片。為了使能準確的觀察結果，要求藥敏片能有規律的分布于平皿培養基上；一般可在平皿中央貼一片，外周可等距離貼若干片（外周一般可貼七片），每種藥敏片的名稱要記住。
3.1.3將平皿培養基置于37℃溫箱中培養24小時后，觀察效果。
3.2牛津杯法
3.2.1在“超凈臺”中，用經（酒精燈）火焰滅菌的接種環挑取適量細菌培養物，以劃線方式將細菌涂布到平皿培養基上。具體方式；用滅菌接種環取適量細菌分別在平皿邊緣相對四點涂菌，以每點開始劃線涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二點劃線至平皿的1/2，依次劃線，直至細菌均勻密布于平皿。（另：可挑取待試細菌于少量生理鹽水中制成細菌混懸液，用滅菌棉拭子將待檢細菌混懸液涂布于平皿培養基表面。要求涂布均勻致密）
3.2.2以無菌操作將滅菌的不銹鋼小管（內徑6nm、外徑8nm、高10nm的圓形小管，管的兩端要光滑，也可用玻璃管、瓷管），放置在培養基上，輕輕加壓，使其與培養基接觸無空隙，并在小管處標記各種藥物名稱。每個平板可放4-6支小管。待分鐘后，分別向各小管中滴加一定數量的各種藥液，勿使其外溢。置37℃培養8-18小時，觀察結果。
3.2.3將平皿培養基置于37℃溫箱中培養24小時后，觀察效果。
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