纖維素酶的分離純化方法
問：本人要做纖維素酶的分離純化，請傳授方法。
答：纖維素酶并不是單一的蛋白酶，而是一個酶系，其中包括至少3種組分。如果你用重組菌表達其中的一個片段或者產酶基因，那么要看你的載體是什么？如果有親和標簽可以用親和層析，如果沒有，那就只能考慮疏水或離子交換等方法了。不過工業上制備纖維素酶一般是不用純化的，中試以上規模的酶制劑生產大多采用真菌發酵，纖維素酶會直接分泌到培養基中，然后通過結晶就可以得到粗酶顆粒，一般不需要色譜純化。
答：3種組分可能都是說得輕的，這每種組分可能都是多種酶組成的酶系，甚至有可能是有機組裝的分子機器--（俺猜測。。。因為纖維素酶的協同作用還是相當厲害的）。不同來源的纖維素酶降解纖維素的機理、側重點都會不相同，很多基因還沒弄清楚，基因工程不太能做，現在商品化的纖維素酶恐怕都是傳統育種方法得到的菌株。
一般采用不同的純化方式：如陰離子、陽離子交換等，搜集每個峰去做各種酶活分析。多亞基、多組分、多種催化活性、纖維素本身又太復雜，你還要格外提防協同作用。
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