實驗室常用溶液的配制標準程序
1 、 目的
保證實驗中用到的各種溶液符合實驗要求。
2 、 該SOP變動程序
本文件的變動，可由任一使用該文件的工作人員提出，報負責人決定。如通過則公布執(zhí)行。
3 、 適用范圍
XX研發(fā)部常用溶液：3M 醋酸鈉、 2N NaOH 、 5M NaCL、 Solution Ⅰ 、 Solution Ⅱ Solution 、 Solution Ⅲ 、 LB培養(yǎng)基、 1M Tris-HCl 、 10 ×TE Buffer 、 10 × PBS Buffer 、 苯酚/ 氯仿/ 異戊醇 、 10%（W/V ）SDS 、 0.5M EDTA(pH 8.0) 、 50 ×TAEBUffer 、 20 ×SSC 、 封閉緩沖液（Wester雜交） 。
4 、 配制
4.1 、 用具
干燥潔凈的200ml量桶一只，三角燒瓶兩只，天平一架，250ml、1000ml廣口瓶各一只。
4.2 、 配制步驟
4.2.1 、 配制NaAC溶液
⑴用天平稱取40.8克分析純的NaOAC固體，置于250ml三角燒瓶中。
⑵用100ml量桶準確取40ml去離子水，搖蕩三角燒瓶使NaOH固體充分溶解
⑶加去離子水將溶液定容到100ml
⑷高壓滅菌后，室溫保存。
4.2.2 、 配制NaOH溶液
⑴用100ml量桶準確取80ml去離子水，置于250ml三角燒瓶中。
⑵用天平稱取8克NaOH固體緩緩加入三角燒瓶中。
⑶搖蕩混勻溶液。用去離子水將溶液體積定容到100ml。
⑷將混勻的溶液轉(zhuǎn)移入玻璃瓶中，室溫保存。
4.2.3 、 配制NaCL溶液
⑴用天平稱取292.2克NaCL固體置于1L燒杯中，加入800ml的去離子水后攪拌溶解。
⑵加去離子水將溶液定容至1L，適量分成小份。
⑶高壓滅菌后，4 0 C 保存。
4.2.4 、 配制 Solution Ⅰ 溶液
（1） 量取1M Tris-HCL(ph8.0) 25ml ,1.5M EDTA(ph8.0) 20ml , 20 %Glucose(1.11M) 45ml, dH 2 O 910ml , 置于1L燒杯中。
（2） 高溫高壓滅菌后，4 0 C 保存。
（3） 使用前每50 ml的 Solution Ⅰ 加入2 ml 的RNaseA（20mg / ml).
4.2.5 、 配制 Solution Ⅱ 溶液
(1) 量取10 %SDS 50 ml, 2N NAOH 50 ml, 置于500 ml 燒杯中。
(2) 加滅菌水定容至 500 ml,充分混勻。
(3) 室溫保存。此溶液保存時間最好不要超過一個月。
注意：SDS易產(chǎn)生氣泡，不要劇烈攪拌。
4.2.6 、 配制 Solution Ⅲ 溶液
（1） 稱量KOAc 147g, CH 3 COOH 57.5g， 置于500 ml 燒杯中。
（2） 加入300 ml去離子水后攪拌溶解。
（3） 加去離子水將溶液定容 至 500 ml。
（4） 高溫高壓滅菌后，4 0 C 保存。
4.2.7 、 配制 LB培養(yǎng)基
（1） 稱取T ryptone 10g, Yeast Extract 5g, NaCl 10g， 置于1L燒杯中。
（2） 加入約800 ml的去離子水，充分攪拌溶解。
（3） 滴加5 N NAOH（約0.2ml），調(diào)節(jié)ph值至7.0。
（4） 加去離子水將培養(yǎng)基 定容 至 1L。
（5） 高溫高壓滅菌后，4 0 C 保存。
4.2.8 配制 1M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)
（1） 稱量121.1g Tris置于1L燒杯.
（2） 加入約800ml的去離子水。充分攪拌溶解。
（3） 按下加入70ml pH7.4, 60 pH7.6,42ml pH8.0濃鹽酸調(diào)節(jié)所需要的值。
（4） 將溶液定容至1L。
（5） 高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：使溶液冷卻至室溫后在調(diào)定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的值大約降低0.03個單位。
4.2.9 、 配制1L 10 ×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0) 100mM Tris-HCl,10mM EDTA
（1）量取溶液1M Tris-HClBuffer(pH7.4,,7.6,8.0)100ml,500mM EDTA(pH 8.0) 20ml，置于1燒杯中。
（2）向燒杯中加入800ml的去離子水，均勻混合。
（3）將溶液定溶至1L后，高溫高壓滅菌。
（4）室溫保存.
4.3.10 、 配制 1L 10 × PBS Buffer 1370mM NaCl, 27mM KCl,10mM Na 2 HPO 4 ,20mM KH 2 PO 4 .
（1）稱量NaCl 80g , KCl 2,Na 2 HPO 4 14.2g , KH 2 PO 4 ,2.7g 置于1L燒杯中。
（2） 向燒杯中加入800ml的去離子水，充分攪拌溶解。
（3）滴加HCl將pH值調(diào)節(jié)至 7.4 ，然后加入去離子水將溶液定容至1L。
（4）高溫高壓滅菌，室溫保存。
注意：上述PBSBuffer中無二價陽離子，如需可在配方中補充1mM CaCl 2 和0.5mM MgCl 2 。
4.3.11 配制 苯酚/ 氯仿/ 異戊醇 （25：24：1）
（1）說明：從核酸除去蛋白質(zhì)常使用苯酚/氯仿/異戊醇（25：24：1）。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機向的分離，而異戊醇有助于消除抽屜過程中出現(xiàn)的氣泡。
（2）配置方法：將平衡苯酚與等體積的氯仿/異戊醇（24：1）均勻混合和后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。
4.3.12 配制 10%（W/V ）SDS 100ml
（1）稱量10g高重度的SDS置于100-200ml燒杯中，加入約800ml的去離子水，68℃加熱溶解。
（2）滴加數(shù)滴濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.2.
（3）將溶液定容至100ml后，室溫保存。
4.3.13 、 配制 1L 0.5M EDTA(pH 8.0)
（1）稱取186.1gNa 2 EDTA.2H 2 O，置于1L燒杯中。
(2）加入800ml去離子水，充分攪拌。
(3）用NaOH調(diào)節(jié)pH值至8.0（約20g NOH） 注意：pH值至8.0時才能完全溶解。
（4）加去離子水將溶液定容至1L.
(5)適量分成小分后，高溫高壓滅菌。
（6）室溫保存。
4.3.14 配制 1L 50 ×TAE BUffer (pH8.5) 2M Tris 醋酸,100mMEDTA
（1）稱量試劑Tris 242g , Na 2 EDTA.2H 2 O 37.2g，置于1L燒杯中。
（2）向燒杯中加入約800ml的去離子水，充分攪拌并溶解。
（3）加入57.1ml的醋酸，充分攪拌。
（4）家去離子水定容至1L后，室溫保存。
4.3.15 、 配制 1L 20 ×SSC 3.0M NaCl, 03M 檸檬酸鈉
（1）稱量試劑NaCl 175.3g ,檸檬酸鈉.2H 2 O 88.2g ，置于1L燒杯中。
（2）向燒杯中加入約800ml的去離子水，充分攪拌溶解。
（3） 滴加14 N HCl，調(diào)節(jié)pH值至7.0后，加去離子水定容至1L.
（4）高溫高壓滅菌后室溫保存。
4.3.16 配制 100ml 預雜交液 /雜交液（DNA雜交用），6 ×SSC (或SSPE) ，5×Denhardts 0.5%(WV) SDS , 100μg / ml Salmon DNA
（1）稱量試劑 30ml 20 ×SSC (或SSPE),10ml 50×Denhardts, 5ml 10 % SDS, 1ml 10μg / ml Salmon DNA,54m dl2H 2 O ，置于200ml燒杯中。
（2）充分混勻后，使用0.45 μm 濾膜濾去雜質(zhì)后使用。
4.3.17 、 配制 100ml 封閉緩沖液（Wester雜交） 5%(W/V)脫脂奶粉 TBST BUffer
（1）稱量5g脫脂奶粉加入到100ml的TBST Buffer中，充分攪拌溶解。
（2）24℃保存待用（本封閉液應現(xiàn)配現(xiàn)用）。
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