微生物培養(yǎng)的基本過程
微生物培養(yǎng)在微生物實(shí)驗(yàn)室中是一項(xiàng)關(guān)鍵的技術(shù)，微生物培養(yǎng)結(jié)果的好壞對(duì)微生物研究工作至關(guān)重要。微生物培養(yǎng)的基本過程如下：
1.準(zhǔn)備培養(yǎng)基
培養(yǎng)基含有微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，包括碳源、氮源、能源、無機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子和水。合適的培養(yǎng)基能夠?yàn)槲⑸锏纳L(zhǎng)提供一個(gè)適宜的生存環(huán)境，以獲得生長(zhǎng)良好的菌株。因此，在準(zhǔn)備培養(yǎng)基前，應(yīng)當(dāng)考慮目的菌株的生長(zhǎng)需求，選擇合適的培養(yǎng)基。
選擇培養(yǎng)基一般有四個(gè)基本原則：
目的明確：明確擬培養(yǎng)何種微生物；明確培養(yǎng)的微生物是用于實(shí)驗(yàn)室研究還是用于生產(chǎn)；明確微生物的生長(zhǎng)特性等等目的；
營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)：根據(jù)微生物的生長(zhǎng)特性確定合適的碳氮比，一般來說，細(xì)菌的碳氮比低，真菌的碳氮比高。
理化適宜：培養(yǎng)基的pH、滲透壓和水活度等理化環(huán)境應(yīng)當(dāng)適宜，即在配制培養(yǎng)基過程中，需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH、滲透壓和水活度等，如：在最適pH方面，細(xì)菌是6.5-7.5，霉菌是4.0-5.8，放線菌是7.5-8.5，酵母菌是3.8-6.0，藻類是6.0-7.0，原生動(dòng)物為6.0-8.0，部分嗜極菌的對(duì)pH要求更高。
成本問題：此部分主要涉及生產(chǎn)過程，顯而易見，選擇合適且成本低的培養(yǎng)基能夠收獲更多的經(jīng)濟(jì)效益。
培養(yǎng)基根據(jù)不同物理形態(tài)可以分為液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基，也可以根據(jù)功能不同分為選擇性培養(yǎng)基和鑒定性培養(yǎng)基。
因此，準(zhǔn)備培養(yǎng)基需要綜合考慮微生物的生長(zhǎng)特性及培養(yǎng)目的選擇合適的培養(yǎng)基。
2.物料滅菌
培養(yǎng)基準(zhǔn)備完成后，需要按照其特性進(jìn)行滅菌處理，同時(shí)準(zhǔn)備其他實(shí)驗(yàn)物料，進(jìn)行滅菌工作。此步驟是防止在后續(xù)培養(yǎng)微生物過程中引入其它微生物，造成雜菌污染的情況。
3.接菌
此步驟需要掌握無菌操作的技術(shù)，將目的菌株進(jìn)行接種的過程，如菌種的復(fù)蘇，以平板劃線法將保藏的菌株在無菌操作下完成接種的過程。
4.微生物培養(yǎng)
完成微生物接種后，將目的菌株放置于合適培養(yǎng)環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，其環(huán)境包括：是否需氧、溫度、濕度、二氧化碳含量等條件的設(shè)置，如溫度：細(xì)菌一般設(shè)置為30-40℃，放線菌30℃，酵母菌25-37℃，霉菌30℃。
5.觀察與記錄
微生物培養(yǎng)后，需要對(duì)微生物的生長(zhǎng)情況進(jìn)行觀察和記錄，包括菌落的形態(tài)、大小、顏色以及數(shù)目等，其生長(zhǎng)情況關(guān)乎著后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
6.收獲與保藏
在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)到一定程度的微生物可用來后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究、生產(chǎn)和保藏，根據(jù)不同的目的對(duì)其進(jìn)行處理。
7.微生物檢測(cè)
培養(yǎng)得到的微生物，可以對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，包括：微生物鑒定、藥敏試驗(yàn)測(cè)試和代謝產(chǎn)物檢測(cè)等等，此步驟是驗(yàn)證培養(yǎng)的微生物是否符合目的要求。
8.微生物滅菌
當(dāng)微生物完成相應(yīng)檢測(cè)、生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)研究后，需要對(duì)微生物進(jìn)行滅菌處理，此步驟是為了防止微生物的污染。
綜上所述，可以知道，微生物培養(yǎng)的基本操作如下：
配制培養(yǎng)基：選擇合適的培養(yǎng)基后，計(jì)算和稱量所需用量，將培養(yǎng)基溶解，分裝至合適的容器，然后包裝；
物料滅菌：將配制好的培養(yǎng)基與實(shí)驗(yàn)所需的物料進(jìn)行滅菌處理；
接菌：無菌操作完成接菌過程；
培養(yǎng)：在適宜培養(yǎng)條件下進(jìn)行微生物的培養(yǎng)過程；
檢測(cè)與保藏：對(duì)培養(yǎng)得到的微生物作相關(guān)檢測(cè)或?qū)⑽⑸锉２兀?/span>
廢棄微生物的處理：對(duì)完成研究或生長(zhǎng)的微生物進(jìn)行滅菌處理。
以上是微生物培養(yǎng)的基本過程和操作，更加具體的培養(yǎng)過程需要依據(jù)不同的微生物進(jìn)行調(diào)整。
