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中國(guó)微生物菌種

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緩沖鹽沖洗色譜柱方法
發(fā)布日期:2022-09-19 08:47:26


緩沖鹽沖洗色譜柱方法


  • 液相色譜和氣相色譜技術(shù)

流動(dòng)相中含有緩沖鹽時(shí),大的原則是:使用前要過渡,使用后要清洗(清洗包括兩個(gè)步驟,一個(gè)步驟是用來(lái)清洗緩沖鹽,另一個(gè)步驟是用來(lái)清洗強(qiáng)保留物質(zhì)的),具體請(qǐng)按如下方式保養(yǎng)色譜柱:


1、使用前的過渡:


用乙腈:水=10:90(如果是甲醇體系則用甲醇:水=10:90)以1ml/min流速過渡30min(目的是防止緩沖鹽在進(jìn)入柱子時(shí)析出);

2、一天分析完成后,即使用后的清洗:


1)用乙腈:水=10:90(或甲醇:水=10:90)以1ml/min流速反向沖洗45min(目的是洗去緩沖鹽,防止緩沖鹽在色譜柱內(nèi)存留引起使用壽命下降);


2)再用乙腈:水=90:10(或甲醇:水=90:10)1ml/min流速反向沖洗45min,(目的是洗去分析過程中積累的強(qiáng)保留物質(zhì),防止強(qiáng)保留物質(zhì)在色譜柱內(nèi)進(jìn)一步積累,影響以后的分析,也防止強(qiáng)保留物質(zhì)的積累導(dǎo)致的柱壓升高),然后色譜柱保存在乙腈:水=90:10(或甲醇:水=90:10)中;


3、如果做完一種化合物,緊接著要做另外一種化合物,由于流動(dòng)相等條件不同,則請(qǐng)先按步驟2清洗色譜柱,再使用色譜柱;要是接下來(lái)做的樣品的流動(dòng)相里也含有緩沖鹽,也請(qǐng)?jiān)诓襟E2清洗過后再按步驟1的方式來(lái)過渡。


1)乙腈:水=10:90或甲醇:水=10:90容易長(zhǎng)菌,溫度越高越容易長(zhǎng)菌,實(shí)驗(yàn)表明,在28度條件下保存至第5天時(shí)發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)菌,不宜多配。


2)Welch公司的色譜柱都能反向沖洗或使用,如果您使用的色譜柱不能反向沖洗或使用,則無(wú)需反沖,正向沖洗本方法也適用,只是反沖的效果相對(duì)較好。



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