糖含量測定
【實驗原理】
苯酚—硫酸 試劑 與游離的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起顯色反應(yīng)，己糖在490nm處有最大吸收，吸收值與糖含量呈線性關(guān)系。
【實驗材料】
1. 實驗器材
721型分光光度計。
2. 實驗 試劑
(1) 98％ 的濃硫酸。
(2) 80％ 苯酚：80g苯酚加20ml水使之溶解，可置冰箱中避光長期貯存。
(3) 6％ 苯酚：臨用前用80％苯酚配制。
(4) 標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液（0.1 mg/ml）：取100mg葡萄糖，用蒸餾水溶解，定容至1L。
(5) 多糖樣品：半乳葡萄甘露聚糖溶液（0.1 mg/ml）。
【實驗操作】
1. 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線：
取9支干燥 試管 ，按下表操作
管號 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
標(biāo)準(zhǔn)溶液（ml） | 0 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 | 1.2 | 1.4 | 1.6 | 1.8 |
蒸餾 水（ml） | 2.0 | 1.6 | 1.4 | 1.2 | 1.0 | 0.8 | 0.6 | 0.4 | 0.2 |
6％苯酚（ml） | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
濃硫酸（ml） | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
靜止10分鐘，搖勻，室溫放置20分鐘 | |||||||||
A 490 | |||||||||
橫坐標(biāo)為多糖微克數(shù)，縱坐標(biāo)為光密度值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2. 樣品含量測定：
取樣品液1.0ml，按上述步驟操作，測光密度。
3．計算:
糖含量(%)=C /（C0× V）×100%
C: 由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的糖微克數(shù)
C0：樣品溶液的濃度（0.1 mg/ml）
V：測定時用的樣品溶液體積（1.0ml）
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