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內(nèi)切酶與外切酶
發(fā)布日期：2025-12-17 16:44:52


內(nèi)切酶與外切酶


如果單純從簡(jiǎn)單稱呼上看，一字之差確實(shí)讓人犯迷糊，關(guān)鍵字在內(nèi)外之上，這里的內(nèi)外其實(shí)是針對(duì)核酸鏈而言的。


先看內(nèi)切酶，根據(jù)是否有序列識(shí)別差異分為限制性內(nèi)切酶和非特異內(nèi)切酶，前者代表如EcoRI, BamHI, HindIII等；后者有DNase I, RNase A等。
值得一提的是，限制內(nèi)切酶算是分子生物學(xué)里面最偉大的發(fā)現(xiàn)之一了，直接推動(dòng)了整個(gè)學(xué)科的發(fā)展，為后續(xù)科學(xué)家靈活“編輯”目標(biāo)序列奠定了理論基礎(chǔ)。
我們可以把DNA或RNA想象成一條長長的珍珠項(xiàng)鏈，每顆珍珠就是一個(gè)核苷酸，而連接珍珠的線就是磷酸二酯鍵，內(nèi)切酶的作用即在此。
內(nèi)切酶是將一段長片段處理為多個(gè)小片段。限制性內(nèi)切酶是基因克隆的基石，我們用它來特異性切割質(zhì)粒DNA和目標(biāo)基因，然后將基因片段插入質(zhì)粒，構(gòu)建重組DNA分子。

外切酶一般是從核酸鏈末端（如3‘端或5’端） 逐個(gè)水解核苷酸，沒有嚴(yán)格的序列特異性，作用于末端，最后得到的產(chǎn)物是單個(gè)核苷酸，如大腸桿菌外切酶 I（Exo I）或牛脾磷酸二酯酶。

在細(xì)胞內(nèi)，外切酶參與DNA損傷修復(fù)。例如，在復(fù)制后，外切酶可降解RNA引物，并為DNA鏈的準(zhǔn)確連接做好準(zhǔn)備。或利用外切酶III（Exo III）的部分降解作用，可將雙鏈DNA處理出單鏈區(qū)，用于制備放射性標(biāo)記的DNA探針。