B16細胞的傳代

細胞增殖快非常好養，但是要及時換液，否則也很容易死亡、或變形。我養的最好的時候，天天都在換液，兩三天就要消化傳代。我用的消化液一般是 消化用含EDTA的胰酶0.25%，個人感覺效果比較好一點。

消化步驟：吸出培養液，加入PBS洗滌（視培養瓶大小加入相應的量，25CM加入1-2ML）而后加一次胰酶（25CM培養瓶加0.6ML）作用2-3分鐘，輕輕搖晃使均勻作用在細胞層面上。

要一直在顯微鏡下觀察，以防消化過頭，等細胞從梭形變成橢圓形（或是棱角變鈍），本來連成片的細胞之間開始有小小的空間，細胞與細胞好象是一粒粒的，界限清楚，這時是消化的最佳時機。（細胞的活力最好，又非常容易吹打）加入培養液進行吹打十幾次即可。

如果消化到細胞全部飄起來，就消化的稍微有點過了。如果細胞的形態還是老樣子，就消化的有點不足，吹打起來十分費力，有大片的細胞就會貼在壁上，起不來，而且很不均勻。只好重新加胰酶消化。

還有就是細胞長的比較密時，胰酶可以比平時多加一點，消化時間適當延長。

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