HePG2細(xì)胞和L-02細(xì)胞的傳代經(jīng)驗(yàn)
HePG2細(xì)胞屬人肝腫瘤的恒生細(xì)胞株,L-02細(xì)胞則是人胎肝細(xì)胞株,二者所使用的培養(yǎng)基可以是一樣的,即最常見(jiàn)的DMEM。一干使用低糖的。
細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)培養(yǎng)瓶時(shí)既要傳代。使用胰酶消化即可。用D-Hank's液配制成0.25%的胰酶。使用前37度預(yù)熱,細(xì)胞經(jīng)PBS清洗兩遍后,每個(gè)中號(hào)培養(yǎng)瓶加0.7ml的胰酶,胰酶的量可根據(jù)自己培養(yǎng)瓶的大小而定,原則就是能夠蓋滿(mǎn)瓶底。加入胰酶以后,為使酶的活性最大,將培養(yǎng)瓶蓋擰緊后放回培養(yǎng)箱中,3分鐘左右即用含血清的培養(yǎng)基終止消化。如果在室溫情況下消化,時(shí)間相應(yīng)加長(zhǎng),可以在顯微鏡下觀察,當(dāng)細(xì)胞界限已十分清楚,即已分離為單個(gè)細(xì)胞,且有少量細(xì)胞漂起,則要終止消化了。
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