細胞傳代方法

貼壁生長細胞傳代——采用酶消化法傳代。常用的消化液是0.25%胰蛋白酶液。

1、將長成單層的細胞從二氧化碳培養箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養液，加入少許消化液（以液面蓋住細胞為宜）（我常加1ml），靜置5~10分鐘。

2、在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入3~5ml新鮮培養液，吹打，制成細胞懸液。

3、將細胞懸液吸出2ml左右，加到另一個培養瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養箱中，繼續進行培養。

4、傳代細胞培養結果

一般情況，傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養瓶壁上，2~4天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。

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