SP 2/0細胞的傳代經驗
SP 2/0是小鼠骨髓瘤細胞株,貼壁生長,科室給學生開實驗就用此細胞,所用培養基為1640,用小牛血清,濃度15%生長較好。培養孵箱為37度,5%的CO2。
開始將復蘇的細胞傳到小培養瓶(如25ml),由于細胞分泌各種因子及細胞間的相互作用,因此生長較快,1-2天就可進行傳代(當然要達到80-90%的融合)。
消化采用0.25%的胰酶,在顯微鏡下觀察,看細胞形態變圓,而且細胞間界限明顯后,或有極少數細胞漂浮起來就可終止消化。
吹打時,動作要輕、快,而且吹管中要吸滿液體,這樣就不會產生氣泡,吹打按一定的順序進行,將瓶子徹底吹打,尤其是邊緣和角落。
傳代,先將此瓶細胞只傳到一個大瓶中,以保證細胞的數量,小瓶也可保留,繼續培養。這樣3-4天又可進行傳代。
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