氨基柱的使用和保養(yǎng)

按柱子說明書的方法去做即可，進(jìn)口柱一般都有詳細(xì)說明。不同品牌的柱子可能不盡相同。我的phenomenex色譜柱說明書上把氰基柱列為正相柱（其實也可用于反相色譜），保存時用異丙醇或正己烷。柱效下降時的清洗程序為：用做正相柱時其清洗過程為氯仿、異丙醇、二氯甲烷10倍柱體積依次沖洗；用做反相柱時其清洗過程為5%乙腈水溶液、四氫呋喃、95%乙腈10倍柱體積依次沖洗。

氨基柱的使用：

需要注意的是，氨基柱的鍵合官能團(tuán)氨丙基要比C18，C8柱的鍵合官能團(tuán)C18，C8要容易水解，所以首先要做好其使用壽命稍遜的心理準(zhǔn)備，特別是當(dāng)你的使用條件是反相條件下時。反相條件下使用時，要特別注意控制PH值范圍，PH值越低越有發(fā)生水解的危險，流動相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險。所以，在使用后以及準(zhǔn)備長時間放置該柱時，必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機(jī)溶劑中是很好的保養(yǎng)措施。

有一種情況是，當(dāng)使用氨基柱進(jìn)行酸性物質(zhì)如果汁的分析時（分析其中的糖份），酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在，可能會使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化，導(dǎo)致使用一段時間后對于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。這時，Kromasil專家所給的建議是：用5～10倍的柱體積的含0.5～1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液沖洗該柱（沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動相洗去多余氨），之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1%。

氨基柱的清洗：

簡單說起來，正相條件下使用的氨基柱你就參照硅膠柱的清洗方法；反相條件下使用的氨基柱你就參照C18的清洗方法。

平時在正相條件下使用：

首先用50倍柱體積的異丙醇清洗，因異丙醇粘度較大可適當(dāng)放低流速；之后，用50倍的甲醇清洗；之后，用異丙醇過渡回到平常使用的正相流動相，即可。

平時在反相條件下使用：

緩沖鹽應(yīng)及時沖洗，以及不能直接用純甲醇沖洗緩沖鹽等，屬常識就不作特別交待了。

用50倍純甲醇沖洗；之后，用異丙醇過渡后，用二氯甲烷沖洗色譜柱；之后，再用異丙醇過渡回來到甲醇條件下。

這些清洗方法，主要是針對當(dāng)樣品中有雜質(zhì)逐步吸附累積到填料上時的處理方法，色譜柱表現(xiàn)行為為諸如柱壓增高柱效降低等。

其他一些通用小技巧如調(diào)轉(zhuǎn)柱子低流速沖洗，在污染物累積在柱頭時是比較有效的，不再贅述。

最后，仍然建議：在實驗室中做好定期柱效檢測工作，是重要而有意義的。

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