卵磷脂的提取及鑒定
一、實驗目的
1.加深了解磷脂類物質的結構和性質。
2.掌握卵磷脂的提取鑒定的原理和方法。
二、實驗原理
磷脂是生物體組織細胞的重要成分，主要存在于大豆等植物組織以及動物的肝、腦、脾、心等組織中，尤其在蛋黃中含量較多(10%左右)。
卵磷脂和腦磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性質可將其與中性脂肪分離開；此外，卵磷脂能溶于乙醇而腦磷脂不溶，利用此性質又可將卵磷脂和腦磷脂分離。
新提取的卵磷脂為白色，當與空氣接觸后，其所含不飽和脂肪酸會被氧化而使卵磷脂呈黃褐色。
卵磷脂被堿水解后可分解為脂肪酸鹽、甘油、膽堿和磷酸鹽。
甘油與硫酸氫鉀共熱，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸鹽在酸性條件下與鉬酸銨作用，生成黃色的磷鉬酸沉淀；膽堿在堿的進一步作用下生成無色且具有氨和魚腥氣味的三甲胺。
這樣通過對分解產物的檢驗可以對卵磷脂進行鑒定。
三、 儀器和試劑
儀器
小燒杯、試管。
試劑
1. 雞蛋黃
2. 紅色石蕊試紙
3. 95%乙醇
4. 10%氫氧化鈉溶液
5. 鉬酸銨 試劑 將6g 鉬酸銨溶于15mL 蒸餾水中，加入5mL 濃氨水，另外將24mL 濃硝酸溶于46mL的蒸餾水中，兩者混合靜置一天后再用。
6. 丙酮
7. 乙醚
8. 3%溴的四氯化碳溶液
9. 硫酸氫鉀
四、操作步驟
(一)卵磷脂的提取
稱取約10g 蛋黃于小燒杯中，加入溫熱的95%乙醇30mL，邊加邊攪拌均勻，冷卻后過濾。
如濾液仍然混濁，可重新過濾直至完全透明。將濾液置于蒸發皿內，水浴鍋中蒸干，所得干物即為卵磷脂。
(二)卵磷脂的溶解性
取干燥 試管 ，加入少許卵磷脂，再加入5mL 乙醚，用玻棒攪動使卵磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5mL，觀察實驗現象。
(三)卵磷脂的鑒定
1.三甲胺的檢驗
取干燥 試管 一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氫氧化鈉溶液，放入 水浴 中加熱15min，
在管口放一片紅色石蕊試紙，觀察顏色有無變化，并嗅其氣味。將加熱過的溶液過濾，濾液供下面檢驗。
2.不飽和性檢驗
取干凈試管一支，加入10滴上述濾液，再加入1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液，振搖試管，觀察有何現象產生。
3.磷酸的檢驗
取干凈試管一支，加入10滴上述濾液和5～10滴95%乙醇溶液，然后再加入5~10滴鉬酸銨試劑，觀察現象；最后將試管放入熱 水浴 中加熱5～10min，觀察有何變化。
4.甘油的檢驗
取干凈 試管 一支，加入少許卵磷脂和0.2g 硫酸氫鉀，用 試管 夾夾住并先在小火上略微加熱，使卵磷脂和硫酸氫鉀混熔，然后再集中加熱，待有水蒸氣放出時，嗅有何氣味產生。
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