嚴格厭氧菌推薦培養容器
預還原培養基的適宜容器是成功培養嚴格厭氧菌的重要前提。為此,開發了特殊的玻璃器皿,可方便地實現完全的氣密密封。其中,橡膠塞材質至關重要。只有丁基橡膠(butyl rubber)制成的塞子或隔墊才能有效阻止空氣滲透進入容器。然而,注射針頭反復穿刺塞子可能導致其透氧性增加。通常,塞子越厚,可重復使用的次數越多,同時保持其不透氣性。
市售適用于厭氧培養的容器主要有兩種類型:
? Hungate管:通過帶有凸緣式丁基橡膠隔墊(flange-type butyl rubber septum)和開孔直徑9mm的螺帽密封。該設計允許使用注射針頭穿刺隔墊進行操作。
? Balch管:比Hungate管更堅固。若培養過程中可能產生2至3 bar(巴)的超壓,推薦使用此類型。其采用厚丁基橡膠塞密封,并通過鋁蓋卷邊(aluminium crimp)固定。密封和移除鋁蓋需使用專用工具(卷邊器/開蓋器)。
作為Balch管的替代品,也可使用各種規格的血清瓶(serum bottles)。然而,血清瓶的堅固性不及Balch管。若培養的菌株預計在培養過程中會產生大量氣體(見下文),操作時須格外謹慎。
預還原培養基可在上述兩種容器中,于室溫避光條件下保存數周而不被氧化。
警告: 部分微生物在生長過程中會產生大量氣體(例如梭菌通過發酵產氣)。在密閉容器中生長時,產生的氣體可導致顯著超壓。已知生長過程中會積累氣體的菌株,應接種于液體培養基填充量不超過容器容積25% 的容器中進行培養。此外,對于生長快速的菌株,其培養物應至少每日排氣一次以避免超壓。操作可能存在超壓的玻璃容器時,必須佩戴防護目鏡!