DSMZ 厭氧菌概述
1. 厭氧菌概述
廣義而言,專性厭氧菌可定義為無法利用分子氧進行生長的微生物。根據(jù)其對氧氣存在的耐受性,可進一步區(qū)分。
? 耐氧厭氧菌
僅在大氣中存在顯著濃度氧氣時受到輕微抑制。例如,腸梭菌 (Clostridium intestinale) DSM 6191T 在常壓空氣環(huán)境下培養(yǎng)的瓊脂平板表面也能生長良好。
? 另一個極端是嚴格厭氧菌
它們在暴露于低濃度氧氣時即會死亡或立即停止生長。因此,在操作這類微生物的所有步驟中保持無氧條件至關重要。大多數(shù)嚴格厭氧菌不僅需要無氧環(huán)境以啟動生長,還需培養(yǎng)基的氧化還原電位低于 -300 mV(即 Eh 值 < -300 mV)。該電位條件只能通過向培養(yǎng)基中添加還原劑來實現(xiàn)(詳見“還原劑與刃天青”章節(jié))。在這兩種極端類型之間,存在各種適應性的中間類型。
大多數(shù)厭氧微生物營養(yǎng)要求苛刻,需要添加多種補充成分的復雜培養(yǎng)基。
在 DSMZ 菌株目錄 (https://www.dsmz.de/catalogues/catalogue-microorganisms.html) 中,每種 DSM 菌株均推薦有特定的培養(yǎng)基編號。建議優(yōu)先使用為各菌株推薦的培養(yǎng)基配方,這些培養(yǎng)基配方經(jīng)過了培養(yǎng)驗證,改用其他培養(yǎng)基可能導致生長延遲或完全失敗。
使用厭氧菌株前,務必查閱其所需培養(yǎng)基配方并閱讀相關培養(yǎng)文獻。
DSMZ 提供的許多嚴格厭氧菌僅以活性生長培養(yǎng)物形式供應。我們推薦使用 Hungate 技術培養(yǎng)此類菌株。下文將簡述該培養(yǎng)技術及其所需實驗設備。關于 Hungate 技術的詳盡描述可參考 Hungate (1969) 和 Wolfe (1971) 的綜述,而 Breznak 和 Costilow (1994) 的文獻則包含更廣泛的厭氧培養(yǎng)信息。但請注意,即使有詳細描述,某些厭氧培養(yǎng)操作步驟未經(jīng)演示往往難以掌握。因此,對于厭氧微生物學初學者,最佳方式是前往已常規(guī)應用厭氧培養(yǎng)技術的實驗室進行學習。
DSMZ 以凍干形式提供的厭氧菌株,通常對短暫暴露于低濃度氧氣不敏感(即 非嚴苛厭氧菌)。例如,大多數(shù)梭菌 (Clostridium) 和硫酸鹽還原菌屬于此類(但并非全部)。若收到 DSMZ 提供的非嚴苛厭氧菌真空干燥樣品安瓿瓶,也請參閱“真空干燥厭氧菌種的操作”章節(jié)的說明。
關于難培養(yǎng)微生物(如產(chǎn)甲烷菌或超嗜熱菌)的進一步操作指南,敬請訪問 DSMZ 官方網(wǎng)站獲取。