酶的抑制劑與激活劑及溫度對酶活性的影響
一、目的和要求:
1、加深對酶性質的認識
2、了解酶促反應的激活與抑制,學習檢測激活劑和抑制劑影響酶反應的方法和原理。
二、實驗原理:
酶的活性常受到某些物質影響,有些物質能增加酶的活性,稱為酶的激活劑;另一些物質則降低酶的活性,稱為抑制劑。
很少量的激活劑或抑制劑就會影響酶的活性,而且常具有特異性(值得注意的是激活劑和抑制劑不是絕對的,有些物質在低濃度時為某種酶的激活劑,而在高濃度時則成為該酶的抑制劑,NaCl是唾液淀粉酶的激活劑,但NaCl濃度到1/3飽和度時就可抑制唾液淀粉酶的活性)。
酶的催化作用受溫度的影響,在最適溫度下,酶的反應速度最大,大多數動物酶的最適溫度為37-40℃。植物酶的最適溫度為50-60℃。酶對溫度的穩定性與其存在形式有關,有些酶的干燥劑,雖加熱到100℃,其活性并無明顯改變,但在100℃的溶液中卻很快的完全失去活性。低溫能降低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。
三、操作方法
1、酶的激活劑與抑制劑
[注]保溫時間根據個人唾液淀粉酶活力調整
2、溫度對酶活力的影響
淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍色。糊精按其分子的大小,遇碘可呈藍色,紫色,暗色或紅色。最簡單的糊精遇碘不呈藍色。麥芽糖遇碘也不呈色。在不同溫度下,淀粉被唾液淀粉酶水解的程度,可由水解混合物遇碘呈現的顏色來判斷。
取3支試管,編號后按下表加入 試劑 ,搖勻,將2號、3號兩試管放入37℃恒溫水浴中,1號管放入冰水中,10分鐘后取出,(將1號管內液體分為兩半)用碘化鉀-碘溶液來檢驗1、2、3號管內淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。記錄并解釋結果,將1號管中剩下的一半溶液放入37℃水浴中繼續保溫10分鐘后,再用碘液檢驗,結果如何?
管號 | 材料 | 預處理 | 加底物 | 處理 | 檢測 |
1 | 1ml 酶液 | 冰浴5分鐘 | 每管加入0.2%淀粉1.5ml | 冰浴10分鐘 | 一半在37℃ 分兩半 水浴10分鐘 加I 2 1-2滴 一半不處理 |
2 | 1ml 酶液 | / | 37℃水浴 10分鐘 | 加I 2 1-2滴 | |
3 | 1ml 酶液 | 沸水浴5 分鐘 | 37℃水浴 10分鐘 | 加I 2 1-2滴 |
四、 試劑
(1)稀200-500倍的新鮮唾液
(2)0.2%淀粉的0.3%氯化鈉溶液,需新鮮配制
(3)碘化鉀-碘溶液,20克碘化鉀及10克碘溶于100毫升 蒸餾 水中,用前稀釋10倍。
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