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蛋白質沉淀反應—蛋白質的鹽析作用
發布日期:2022-08-11 08:38:34


蛋白質沉淀反應—蛋白質的鹽析作用


【實驗原理】


鹽析現象是指—般蛋白質在高濃度鹽溶液中溶解度下降,故向其溶液中加入中性鹽至一定濃度時,蛋白質即自溶液中沉淀析出。鹽析作用與兩種因素有關:


①蛋白質分子被濃鹽脫水;


②分子所帶電荷被中和。


蛋白質的鹽析作用是可逆過程,用鹽析方法沉淀蛋白質時,較少引起蛋白質變性,經透析或用水稀釋時又可溶解。


鹽析不同的蛋白質所需中性鹽濃度與蛋白質種類及pH有關。分子量大的蛋白質(如球蛋白)比分子量小的(如清蛋白)易于析出。球蛋白在半飽和硫酸銨溶液中即可析出,而清蛋白需在飽和硫酸銨溶液中才能析出。


【 試劑 】


1.雞蛋清的氯化鈉溶液(一份雞蛋清加10份的0.9%氯化鈉溶液)


2.固體硫酸銨


3.10%氫氧化鈉溶液


4..1%硫酸銅溶液


【實驗操作】


1.取雞蛋清氯化鈉溶液約2ml于 試管 中,加入硫酸銨粉末,至硫酸銨飽和不再溶解為止,此時溶液顏色為乳白色,用濾紙過濾。


2.取濾液做雙縮脲反應,檢查濾液中有無蛋白質存在。


蛋白質沉淀用1ml 蒸餾 水溶解后作雙縮脲反應,證明鹽析的蛋白質重新溶解于水而未引起變性。





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