乙酰膽堿酯酶染色
問：我想利用乙酰膽堿酯酶染色將小鼠結腸平滑肌中的膽堿能神經顯示出來，并用軟件作定量分析，但不知該染色方法所用試劑及具體方法，上海何處可做該染色？請各位大俠幫幫忙！
另不知這種方法與將腸黏膜勻漿后測定乙酰膽堿酯酶，那一種更好？謝謝！
答：乙酰膽堿酯酶（Acetylcholinesterase）
染色步驟
1、下述溶液內孵育15分鐘37C
碘化乙酰硫膽堿 12.5 mg
蒸餾水 2.5 ml
0．82%醋酸鈉 15.5 ml
0．6%醋酸 0.5 ml
2．94%檸檬酸鈉 1.5 ml
0．75%硫酸銅 2.5 ml
0．165%鐵氰化鉀 2.5 ml
（總量25 ml）
2、水洗
3、蘇木精染色1分鐘
4、水洗1-2分鐘
5、脫水、透明、封固
乙酰膽堿酯酶染色方法2
染色步驟
1、福爾馬林前固定15~25分鐘
2、去離子水充分沖洗兩次，每次1分鐘
3、在下述基質內孵育4小時，40C
碘化乙酰硫膽堿 5 mg
0．1M 馬來酸氫鈉緩沖液PH6.0 6.5 ml
0．1M枸緣酸鈉溶液 0.5 ml
0．03M硫酸銅 1 ml
蒸餾水 1 ml
0．005M高鐵氰化鉀 1 ml
問：謝謝高人指點，我想問一下鐵氰化鉀哪里能買到呀，組織要冰凍處理嗎？
答：鐵氰化鉀，一般化學試劑中心都可購到，我們實驗室采用冰凍切片。需要注意的是，乙酰膽堿酯酶染色需要的是無離子水，入反應液時要用無離子水漂洗干凈（3次，每次2min），反應液要現配現用，不能超過30min，反應液的PH值也很重要，否則會影響棕紅色沉淀的效果。
北京天優福康生物科技有限公司
服務熱線：400-860-6160
聯系電話/微信：13718308763
QQ:2136615612 3317607072
E-mail：Tianyoubzwz@163.com
