氨基酰-tRNA的生成
氨基酸在進行合成多肽鏈之前,必須先經(jīng)過活化,然后再與其特異的tRNA結合,帶到mRNA相應的位置上,這個過程靠氨基酰tRNA合成酶催化,此酶催化特定的氨基酸與特異的tRNA相結合,生成各種氨基酰tRNA.每種氨基酸都靠其特有合成酶催化,使之和相對應的tRNA結合,在氨基酰tRNA合成酶催化下,利用ATP供能,在氨基酸羧基上進行活化,形成氨基酰-AMP,再與氨基酰tRNA合成酶結合形成三聯(lián)復合物,此復合物再與特異的tRNA作用,將氨基酰轉移到tRNA的氨基酸臂。
原核細胞中起始氨基酸活化后,還要甲酰化,形成甲酰蛋氨酸t(yī)RNA,由N10甲酰四氫葉酸提供甲酰基。而真核細胞沒有此過程。
前面講過運載同一種氨基酸的一組不同tRNA稱為同功tRNA。一組同功tRNA由同一種氨酰基tRNA合成酶催化。氨基酰tRNA合成酶對tRNA和氨基酸兩者具有專一性,它對氨基酸的識別特異性很高,而對tRNA識別的特異性較低。
氨基酰tRNA合成酶是如何選擇正確的氨基酸和tRNA呢?按照一般原理,酶和底物的正確結合是由二者相嵌的幾何形狀所決定的,只有適合的氨基酸和適合的tRNA進入合成酶的相應位點,才能合成正確的氨酰基tRNA。現(xiàn)在已經(jīng)知道合成酶與L形tRNA的內(nèi)側面結合,結合點包括接近臂,DHU臂和反密碼子臂。
乍看起來,反密碼子似乎應該與氨基酸的正確負載有關,對于某些tRNA也確實如此,然而對于大多數(shù)tRNA來說,情況并非如此,人們早就知道,當某些tRNA上的反密碼子突變后,但它們所攜帶的氨工酸卻沒有改變。1988年,候稚明和Schimmel的實驗證明丙氨酸t(yī)RNA酸分子的氨基酸臂上G3:U70這兩個堿基發(fā)生突變時則影響到丙氨酰tRNA合成酶的正確識別,說明G3:U70是丙氨酸t(yī)RNA分子決定其本質的主要因素。tRNA分子上決定其攜帶氨基酸的區(qū)域叫做副密碼子。一種氨基酰tRNA合成酶可以識別以一組同功tRNA,這說明它們具有共同特征。例如三種丙氨酸t(yī)RNA(tRNAAlm/CUA,tRNAAim/GGC,tRNAAin/UGC都具有G3:U70副密碼子。)但沒有充分的證據(jù)說明其它氨基酰tRNA合成酶也識別同功tRNA組中相同的副密碼子。另外副密碼子也沒有固定的位置,也可能并不止一個堿基對。
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