DNA復制起點
不論細胞中只含有一條染色體(原核生物)還是有多條染色體,細胞每次分裂時每一條染色體都要精確地復制一次,也就是構成染色體的DNA分子要復制一次。復制時,雙鏈DNA分子的每一條單鏈成為新生成的DNA單鏈的模板鏈,即新合成的DNA雙鏈分子中,一條單鏈是原來的親鏈,另一條單鏈是新合成的子’鏈,這就是DNA的半保留復制。發生復制的單個DNA單元稱為復制子(repli—con)。每個復制子在每次細胞分裂期間只發動一次復制事件。復制子有控制啟動復制的元件,稱為復制起點(origin of replication),有的還有一個復制終點(termi—lus)。
原核細胞染色體只有一個復制子,在一個復制起點上啟動復制整條染色體。細菌細胞里的質粒也有自己的復制子,有的受控于細菌細胞而同細菌染色體同步復制,這種質粒稱為嚴緊型質粒;有的則獨立于細菌細胞而自主地進行復制,稱為松弛型質粒。真核生物染色體上有許多個復制子,每一復制子的復制速率低于原核生物。表4—1列出有關復制子的一些基本數據。從酵母中最早分離出真核生物染色體復制子中啟動DNA復制的序列,稱為自主復制序列(autonomouslyrepli—cating sequence,ARS)。以后在其他真核生物染色體中也確證有ARS。ARS有一個A.T富集區,這個區域內有若干個位點,當這些位點發生突變時會影響到復制起始的功能。對ARS作系統的比較分析后發現,當在一個14 bp的“核心”區中缺 失了由11個A·T堿基對組成的一致序列后,復制起始功能就完全消失。這個一致序列是所有已知的ARS的惟一的同源序列。原核生物和真核生物染色體復制子的復制起點都是一種靜止的結構,但線粒體的復制起點則是另一種類型。它(表4-1)不同于染色體DNA分開成兩股單鏈后,雙向進行DNA合成,而是以環狀DNA雙鏈中的一條單鏈作為模板(哺乳動物線粒體DNA中稱為重鏈——H鏈),啟動DNA新鏈的合成,這樣只合成很短一段DNA代替了原來的另一條DNA單鏈(輕鏈——L鏈)中的一段。這一段L鏈仍保持單鏈狀態,從而形成D環突(D-loop,displacement loop)。哺乳動物線粒體的D—環突約有500~600個堿基,保持D—環突的短鏈DNA是不穩定的,常被降解和重新合成(圖4—2)。有些線粒體DNA 有幾個D—環突,說明它有幾個復制起點。葉綠體DNA的復制起點的結構同線粒體一樣,高等植物葉綠體中有2個D—環突。
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