生化實驗的基本操作
1.配制溶液時,必須隨時攪拌或振蕩混合。配制完了時,必須充分?jǐn)嚢杌蛘袷幓旌稀?/span>
2.攪拌使用的玻璃攪棒,必須兩頭都燒圓滑。
3.攪棒的粗細(xì)長短,必須與容器的大小和所配制的溶液的多少呈適當(dāng)比例關(guān)系。不能用長而粗的攪棒去攪拌小離心管中的少量溶液。
4.攪拌時,盡量使攪棒沿著器壁運動,不攪入空氣,不使溶液飛濺。
5.傾入液體時,必須沿器壁慢慢傾人以免有大量空氣混入。傾倒表面張力低的液體(如蛋白質(zhì)溶液)時,更需緩慢仔細(xì)。
6.振蕩溶液時,應(yīng)沿著圓圈轉(zhuǎn)動容器,不應(yīng)上下振蕩。
7.振蕩混合小離心管中液體時,可將離心管握在手中,以手腕、肘或肩作軸來旋轉(zhuǎn)離心管; 也可由一手持離心管上端用另一手彈動離心管;也可用一手大拇指和食指持管的上端,用其余三個手指彈動離心管。手指持管的松緊要隨著振動的幅度變化。還可以把雙手掌心相對合攏,住離心管,來回挫動。
8.在容量瓶中,混合液體時,應(yīng)倒持容量瓶搖動,用食指或手心頂住瓶塞,并不時翻轉(zhuǎn)容量瓶。
9.在分液漏斗中振蕩液體時,應(yīng)用一手在適當(dāng)斜度下倒持漏斗,用食指或手心頂住瓶塞,并用另一手控制漏斗的活塞。一邊振蕩,一邊開動活塞,使氣體可以隨時由漏斗泄出。
10.研磨配制肢體溶液時,要使杵棒沿著研缽的單方向進(jìn)行,不要來回研磨。
(二)沉淀的過濾和洗滌
1.過濾沉淀一般使用濾紙。
2.應(yīng)根據(jù)沉淀的性質(zhì)選擇不同的濾紙.膠狀沉淀,應(yīng)使用質(zhì)松孔大的濾紙.一般大小顆粒的結(jié)晶形成沉淀,應(yīng)使用致密孔小的濾紙。而極細(xì)的沉淀,則應(yīng)使用致密孔最小的濾紙。濾紙越致密,過濾就越慢。
3.濾紙的大小要由沉淀量來決定,并不是由溶液的體積來決定。沉淀量應(yīng)裝到濾紙高度的1/3左右。最多不應(yīng)超過1/2,通常使用直徑為7-9厘米的圓形濾紙。
4.折疊濾紙應(yīng)先整齊的對折,錯開一點再對折,打開后形成一邊一層,一邊三層的圓錐體。折疊尖端時不可過于用力,以免容易出洞。放入漏斗中時,濾紙邊緣應(yīng)完全吻合。撕去三層一邊的外面兩層部分的尖端,使濾紙上緣能更好的貼在漏斗的壁上,不留縫隙。而下面部分則有空隙以利于提高過濾速度。
5.濾紙上緣一般應(yīng)低于漏斗口上周0.5至1厘米。潤濕濾紙時應(yīng)用指尖輕壓濾紙趕凈濾紙和漏斗間的氣泡,使濾紙緊貼漏斗壁。同時漏斗頸內(nèi)必須充滿液體,這樣,才可籍液體的重量而對于待液體產(chǎn)生吸濾作用。
6.過渡時,為了防止沉淀堵塞濾紙的孔洞,通常采用傾泄法,即先小心的把溶液傾入漏斗而不使沉淀流入,只在過濾的最后一步才把沉淀轉(zhuǎn)移到漏斗上。
7.過濾時,將玻璃棒直立在三層濾紙的中間部分,其下端接近但不能觸及濾紙,并使盛器緊貼玻棒,使液體順玻棒緩緩流入漏斗。液體最多加到距濾紙上緣3-4毫米處,過多則沉淀會因濾紙的毛細(xì)管作用而爬到漏斗壁上去。
8.在容器中洗滌沉淀一般采用傾注法。洗滌時,采取少量多次的方法最為有效。通常,容易洗滌的粗粒晶形沉淀洗 2—3次,難洗滌的粘稠無定形沉淀則需洗 5—6次。注意,每次都應(yīng)盡量傾以增加洗滌效率,并防止沉淀流失。
9.轉(zhuǎn)移沉淀時,先向沉淀中加入濾紙一次所能容納量的洗滌液,攪拌成為混懸液,不要等待沉淀下沉,立即按傾注清液的同樣方式傾入漏斗。容器內(nèi)剩余的沉淀可以用少量洗滌液按上述方法重復(fù)數(shù)次,直到全部轉(zhuǎn)移到漏斗內(nèi)。
10.在漏斗內(nèi)洗滌沉淀時,先將沉淀輕輕攤開在漏斗下部,再用滴管(或洗瓶)將洗滌液加入到漏斗上緣稍下的地方,同時轉(zhuǎn)動漏斗,并使洗滌液沿著漏斗不斷向下移動,直到洗滌液充滿濾紙一半時立即停止。待漏斗中洗滌液完全漏出后,再進(jìn)行第二次洗滌。通常,完全洗去沉淀所吸附的不擇發(fā)物質(zhì),約需8—10次左右。確知沉淀已經(jīng)洗凈,需要進(jìn)行必要的檢驗。必須注意,沉淀的過濾和洗滌工作一定要一次完成,不可間斷。
(三)烘箱和恒溫箱的使用
烘箱又叫干燥箱,常用的是電熱鼓風(fēng)干燥箱。干燥箱用于物品之干燥和干熱滅菌,工作溫度為50—250℃。恒溫箱又叫培養(yǎng)箱,用于細(xì)菌、生物培養(yǎng)等,工作溫度自室溫以上至60℃。這兩種 儀器 工作原理、結(jié)構(gòu)及使用方法相似。
1.使用方法:
(1)檢查溫度計是否插入座內(nèi),應(yīng)插在放氣調(diào)節(jié)器中部的小孔內(nèi)。
(2)把電源插頭插好,合上電閘。
(3)將電熱絲分組開關(guān)的旋鈕撥到(l)或(2)(視需要的溫度而定),再將自動恒溫控制旋扭沿順時針方向旋轉(zhuǎn),指示燈紅燈亮表示電熱絲開始加熱。此時也可開鼓風(fēng)機幫助箱內(nèi)熱空氣對流。
(4)在恒溫過程中,應(yīng)注意觀察溫度計。待溫度將要達(dá)到需要溫度值(差2—3℃)時,使指示燈綠燈正好發(fā)亮,此時表示電熱絲停止加熱,箱內(nèi)溫度即能自動控制在所需要的溫度(±0.5℃)。
(5)恒溫過程中,如不需要多組電熱絲同時加熱時,應(yīng)將電熱絲分組開關(guān)的旋鈕撥到(1)檔。
(6)工作一定時間后需要將潮氣排出,可打開放氣調(diào)節(jié)器,也可打開鼓風(fēng)機。
(7)使用完后,關(guān)閉鼓風(fēng)機馬達(dá)開關(guān),將電熱絲分組開關(guān)旋鈕和自動恒溫控制旋扭沿反時針方向施回至零位。
(8)斷開電閘,將電源插頭撥出插座。
北京天優(yōu)福康生物科技有限公司
官網(wǎng):http://www.jyzjsd.com/
服務(wù)熱線:400-860-6160
聯(lián)系電話/微信:13718308763
QQ:2136615612 3317607072
E-mail:Tianyoubzwz@163.com