過氧化氫酶、過氧化物酶的作用
一、目的:
進一步加深對酶催化作用及溫度、底物對酶作用影響的認識。
二、原理:
過氧化氫酶(E)能催化過氧化氫分解,產(chǎn)生水及分子氧。作用機制如下:
過氧化物酶能催化過氧化氫釋出新生氧以氧化某些酚類和胺類物質(zhì),例如氧化溶于水中的焦性沒食子酸生成不溶于水的焦性沒食子橙(橙紅色);氧化愈創(chuàng)木脂中的愈創(chuàng)木酸成為藍色的愈創(chuàng)木酸的臭氧化物。
三、器材及 試劑 :
1.器材:
2. 試劑 :
①2%過氧化氫溶液。
②1%焦性沒食子酸水溶液:焦性沒食子酸1g,溶于100ml蒸餾水。
③白菜梗提取液:白菜梗約5g,切成細塊,置研缽內(nèi),加蒸餾水約15ml,研磨成漿,經(jīng)棉花或紗布過濾,濾液備用。
四、操作步驟:
1.取 試管 4支,按下表加入試劑。
管 號 | 2%H 2 O 2 (ml) | 新鮮肝糜 (g) | 煮沸肝糜 (g) | 生馬鈴薯 (g) | 熟馬鈴薯 (g) |
1 2 3 4 | 3 3 3 3 | 0.5 — — — | — 0.5 — — | — — 1 — | — — — 1 |
加畢,觀察有無氣泡放出,特別注意肝糜周圍和馬鈴薯周圍。
2.取4支 試管 ,按下表編號及加入試劑:
管 號 | 1%焦性 沒食子酸 | 2%H 2 O 2 | 蒸餾 水 | 白菜梗 提取液 | 煮沸的白菜梗提取液 |
1 2 3 4 | 2ml 2ml 2ml 2ml | 2滴 — 2滴 2滴 | 2ml — — — | — 2ml 2ml — | — — — 2ml |
搖勻后,觀察并記錄各管顏色變化和沉淀的出現(xiàn)。
五、結(jié)果與分析:
記錄各 試管 內(nèi)發(fā)生的現(xiàn)象并加以分析。
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