人胃腺癌細(xì)胞MNK-45體內(nèi)傳代及接種實(shí)體瘤

1、收集對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期的MNK-45細(xì)胞若干瓶,制備成瘤細(xì)胞懸液1*10^8個(gè)/ml左右接種到裸鼠脅部皮下。

2、待腫瘤生長(zhǎng)到0.8g左右時(shí)，選擇1-2只荷瘤（瘤塊必須要求生長(zhǎng)良好且無破損）裸鼠，頸椎脫臼處死，置75%酒精浸泡1-2分鐘后裸鼠置超凈工作臺(tái)，于無菌條件下，剝?nèi)×鰤K并將瘤塊置200目細(xì)胞篩用玻璃棒研磨后用生理鹽水或培養(yǎng)液沖洗。

并用1容器收集瘤細(xì)胞懸液，待吹打均勻后置10 ml離心管，1 000 r/min離心5 min，傾出上清，如此反復(fù)沖洗1-2次，然后用生理鹽水或培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋瘤細(xì)胞懸液，將腫瘤細(xì)胞數(shù)調(diào)到1*10^8個(gè)/ml左右，接種到裸鼠脅部皮下。

3、下次傳代重復(fù)第二步驟即可。此外，實(shí)驗(yàn)接種時(shí)也可用此法，不過應(yīng)將接種細(xì)胞數(shù)適當(dāng)減少。我個(gè)人認(rèn)為用這種方法比用培養(yǎng)的細(xì)胞接種傳代好。原因如下：A 接種后的腫瘤形成率高。B 用1-2只裸鼠，就可制備許多細(xì)胞懸液。C 省時(shí)省力。

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