直鏈淀粉和支鏈淀粉的測定(雙波長法)
一、目的
淀粉一般都是直鏈淀粉和支鏈淀粉的混合物。直鏈淀粉和支鏈淀粉含量和比例因植物種類而不同,決定著谷物種子的出飯率和食味品質,并影響著谷物的貯藏加工。通過本實驗學習掌握雙波長測定谷物中直鏈淀粉和支鏈淀粉的含量。
二、原理
根據雙波長比色原理,如果溶液中某溶質在兩個波長下均有吸收,則兩個波長的吸收差值與溶質濃度成正比。
直鏈淀粉與碘作用產生純藍色,支鏈淀粉與碘作用生成紫紅色。如果用兩種淀粉的標準溶液分別與碘反應,然后在同一個坐標系里進行掃描( 400 - 960 mm) 或做吸收曲線
對含有直鏈淀粉和支鏈淀粉的未知樣品,與碘顯色后,只要在選定的波長λ1 ,λ 2 , λ 3 ,λ 4 ,處作 4 次比色,利用直鏈淀粉和支鏈淀粉標準曲線即可分別求出樣品中兩類淀粉的含量。
三、儀器、試劑和材料
1. 儀器
(1) 電子分析天平
(2 )索氏脂肪抽提器 1 套
(3 )分光光度計 1 臺
(4 ) pH 計
(5 )容量瓶 100ml X 2 , 50ml X 16
(6 )吸管 0.5ml X 1, 2ml X 1, 5ml X 1
2. 試劑
( 1) 乙醚或石油醚(沸程 30-60 ℃)
(2 )無水乙醇
( 3 ) 0.5 ml / L KOH 溶液
( 4 ) 0.1 mol / L HCl 溶液
(5) 碘試劑:稱取碘化鉀 2.0g, 溶于少量蒸餾水,再加碘 0.2g, 待溶解后用蒸餾水稀釋定容至 l00ml.
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