直鏈淀粉和支鏈淀粉的測定(雙波長法)

一、目的

淀粉一般都是直鏈淀粉和支鏈淀粉的混合物。直鏈淀粉和支鏈淀粉含量和比例因植物種類而不同，決定著谷物種子的出飯率和食味品質(zhì)，并影響著谷物的貯藏加工。通過本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)掌握雙波長測定谷物中直鏈淀粉和支鏈淀粉的含量。

二、原理

根據(jù)雙波長比色原理，如果溶液中某溶質(zhì)在兩個(gè)波長下均有吸收，則兩個(gè)波長的吸收差值與溶質(zhì)濃度成正比。

直鏈淀粉與碘作用產(chǎn)生純藍(lán)色，支鏈淀粉與碘作用生成紫紅色。如果用兩種淀粉的標(biāo)準(zhǔn)溶液分別與碘反應(yīng)，然后在同一個(gè)坐標(biāo)系里進(jìn)行掃描（ 400 - 960 mm） 或做吸收曲線

對(duì)含有直鏈淀粉和支鏈淀粉的未知樣品，與碘顯色后，只要在選定的波長λ1 ，λ 2 ， λ 3 ，λ 4 ，處作 4 次比色，利用直鏈淀粉和支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線即可分別求出樣品中兩類淀粉的含量。

三、儀器、試劑和材料

1. 儀器

（1） 電子分析天平

（2 ）索氏脂肪抽提器 1 套

（3 ）分光光度計(jì) 1 臺(tái)

（4 ） pH 計(jì)

（5 ）容量瓶 100ml X 2 ， 50ml X 16

（6 ）吸管 0.5ml X 1， 2ml X 1， 5ml X 1

2. 試劑

（ 1） 乙醚或石油醚（沸程 30-60 ℃）

（2 ）無水乙醇

（ 3 ） 0.5 ml / L KOH 溶液

（ 4 ） 0.1 mol / L HCl 溶液

（5） 碘試劑：稱取碘化鉀 2.0g， 溶于少量蒸餾水，再加碘 0.2g， 待溶解后用蒸餾水稀釋定容至 l00ml.

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