葡萄糖氧化酶法測定血糖含量
目的和要求
學習和掌握葡萄糖氧化酶法測定血糖含量的方法。
實驗原理
方法參閱Trinder. P. Ann. Clin. Biochem.,1969, 6:24-27。
醌亞胺在480-550nm范圍內有最大光吸收峰,且醌亞胺的量與葡萄糖的量成正比,利用比色法測定醌亞胺的量,即可計算出血糖的含量。
實驗 試劑 和器材
(一) 試劑
試劑穩定性:原裝試劑在2~8℃避光保存,有效期15個月。混合后2~8℃可穩定1個月,室溫可穩定3天。
實驗樣品:新鮮無溶血血清。
(二)器材:
試管 及 試管 架,吸量管,移液槍,恒溫 水浴 ,722型 分光光度計 。
實驗方法
波長:505nm(480~550nm)溫度:37℃; 比色杯 光徑:1cm
1.將10mlR1與90mlR2混合均勻,既為工作液。桉下表操作:
2.分別混合均勻,37℃保溫10~15分鐘(避免太陽光直射),以空白管調零,分別讀取A標準及A樣品。
注意事項
1.樣品中的葡萄糖濃度超過22.2mmol/L(400mg/dl),可將樣品量減半,改為5ul,標準量不變,重測,結果乘以2。
2.試劑R1為液體酶,注意防凍
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