層析技術概念、原理、分類（凝膠層析和離子交換層析）
一、概念
利用混和物中各組分理化性質（吸附力、分子形狀、大小、分子極性、分子親和力以及分配系數）的差異，在物質經過兩相中進行分離的一種技術。
本世紀初（1903年），俄國植物學家M.C.Jber發現并使用這一技術證明了植物的葉子中不僅有葉綠素，還含有其他色素，實際上他使用的吸附層析。現在層系法已成為生化、分子生物學及其它學科領域有效的分離、分析工具之一。
二、原理
可分離物質：糖類、有機酸、氨基酸、核苷酸。
三、分類
1. 按兩相所處物理狀態分類
氣相層析：氣液層析（固定相為液體）和氣固層析（固定相為固體），流動相為氣體。
液相層析：液液層析（固定相為液體）和液固層析（固定相為固體），流動相為液體。
2. 按層析方式分類
柱層析：固定相裝于柱內，使樣品沿著一個方向移動而分離。
薄層層析：將適當粘度的固定相均勻鋪在薄板上，點樣后，用流動相展開。
紙層析：用濾紙作液體的載體，點樣后用流動相展開。
3. 根據層析原理分類：常用分類法
（1）吸附層析：固定相是固體吸附劑，通過對不同溶質吸附力強弱不同進行分離。
（2）分配層析：利用兩相中的分配系數不同。
分配系數：當一種溶質在兩種給定的互不相溶的溶劑中分配時，在一定溫度下達到平衡后，溶質在兩相中的濃度比值為一常數，即分配系數（Kd）
Kd＝Ca / Cb
Ca和Cb分別代表某一物質在互不相溶的兩相，A相（動相）和B相（靜相）中的濃度。
（3）離子交換層析：固定相是離子交換劑，各組分與其親和力不同
（4）凝膠層析：固定相是多孔凝膠，根據流動相中溶質的分子量大小差異進行分離
（5）親和層析：利用固定相載體表面偶聯具有特殊親和作用的配基，與溶質分子發生可逆的特異性結合進行分離
（6）金屬螯合層析
（7）疏水層析
（8）反相層析
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