木瓜蛋白酶和胰蛋白酶的區別
問:木瓜蛋白酶和胰蛋白酶在消化組織塊上有什么區別嗎?哪一個效果更好?
答:常用的細胞消化液為胰蛋白酶(Trypsin),其功能主要是使細胞間的蛋白質(如細胞外基質)水解,改變細胞間的連接,使組織或細胞片分散成單個細胞,制成細胞懸液用于進一步的實驗。
木瓜蛋白酶(Papain)是從木瓜果實中提煉而得的純天然生物酶,簡稱木瓜酶;木瓜蛋白酶是一種蛋白水解酶,分子量為27000u,由一種單肽鏈組成,含有212個氨基酸殘基。至少有三個氨基酸殘基存在于酶的活性中心部位,他們分別是Cys25、His159和Asp158,另外六個半胱氨酸殘基形成了三對二硫鍵,且都不在活性部位。
木瓜蛋白酶對動植物蛋白、酯、酰胺等有非常強的水解能力,是一種廣譜酶制劑,對卵白蛋白、酷蛋白的最適作用PH值是7,木瓜蛋白酶屬巰基蛋白酶,可水解蛋白質和多肽中精氨酸和賴氨酸的羧基端。并能優先水解那些在肽鍵的N一端具有二個羧基的氨基酸或芳香L一氨基酸的肽鍵。還可以通過切斷殼聚糖的B一(1,4)糖苷鍵,降解植物細胞壁中的殼聚糖。它分解比胰酶更多、更廣泛的蛋白底物。
略溶于水、甘油,水溶液無色或淡黃色,有時呈乳白色;幾乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有機溶劑。最適合PH值5.7(一般3~9.5皆可),在中性或偏酸性時亦有作用,等電點pI8.75;最適合溫度55~60℃(一般10~85℃皆可),耐熱性強,在90℃時也不會完全失活,易受重金屬離子( Fe3+ 、 Cu2+ 、 Hg+ 、 Pb+ 等)和氧化劑的抑制及破壞作用,還原性物質激活。細胞消化同樣可以用 0.1mol/L 的磷酸緩沖液, pH 7.2 配制。
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