酶的固定化方法
至今，還沒有一種固定化方法可以普遍地適用于每一種酶，特定的酶要根據(jù)具體的應(yīng)用目的選擇特定的固定化方法。已建立的固定化方法，大致可分為三類：載體結(jié)合法（包括物理吸附。離子結(jié)合法、鰲合法。共價(jià)結(jié)合法），交聯(lián)法和包埋法（包括聚合物包埋法、疏水相互作用、微膠囊、脂質(zhì)體包埋）。
載體結(jié)合法：
（1）物理吸附法: 是制備固定化酶最早采用的方法，它足以同體表面物理吸附為依據(jù)，使酶一水不溶性載體相接觸而達(dá)到酶吸附的目的。
（2）鰲合法 :這是一種比較吸引人的技術(shù)，它主要是利用螫合作用將酶直接贅合到表面含過渡金屬化合物的載體上，具有較高的操作穩(wěn)定性。
（3）共價(jià)結(jié)合法: 共價(jià)結(jié)合法是通過酶分子上的功能團(tuán)，與載體表面上的反應(yīng)基團(tuán)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)形成共價(jià)鍵的一種固定化方法，是研究得最多的固定化方法之一。
共價(jià)交聯(lián)法:
共價(jià)交聯(lián)法是通過雙功能或多功能試劑，在酶分子間或酶分一產(chǎn)和載體間形成共價(jià)鍵的連接方法。這些具有兩種相同或不同功能基團(tuán)的試劑叫做交聯(lián)劑。常見的交聯(lián)劑有順丁烯二酸配和乙烯共聚物、戊二醛等，其中以戊二醛最為常用。
包埋法:
將酶包埋在高聚物凝膠網(wǎng)格中或高分于半透膜內(nèi)的固定方法；前者又稱為凝膠包埋法，后者則稱為微囊法。包埋法一般不需要與酶蛋白的氨基酸殘基起結(jié)合反應(yīng)，較少改變酶的高級(jí)結(jié)構(gòu)，酶的回收率較高；但它僅適用于小分于底物和產(chǎn)物的酶，因?yàn)橹挥行》肿游镔|(zhì)才能擴(kuò)散進(jìn)人高分子凝膠的網(wǎng)格，并且這種擴(kuò)散阻力還會(huì)導(dǎo)致固定化酶動(dòng)力學(xué)行為的改變和活力的降低。微囊法是利用各類型的膜將酶封閉起來，這類膜能使低分子產(chǎn)物和底物通過，而酶和其他高分于物質(zhì)不能通過。纖維包埋法是將酶包埋在合成纖維的微孔穴中的方法，其優(yōu)點(diǎn)是成本低、可用于酶結(jié)合的表面積大。有優(yōu)良的抗微生物和抗化學(xué)試劑的性能，最常用的聚合物是醋酸纖維素。
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