常用HE染色法試劑配制
一、蘇木素
(1) Harris蘇木素:
配方:蘇木素 1 g 無水乙醇 10 ml蒸餾水 200 ml 鉀明礬 20 g HgO 0.5 g
先將蘇木素溶于無水乙醇中,備用。把明礬放入蒸餾水,加熱溶解,再加入備用的蘇木素,煮沸 2 分鐘,先加入少量的氧化汞,防止氧化過程中蘇木素外溢,玻棒攪拌,然后,邊攪拌邊加入氧化汞。加完后,立即移至冰水中,加速其冷卻,靜置一夜后,過濾。用前以 5% 的比例加入冰醋酸。如配好后時間較長,冰醋酸的量可適當多加一點。冰醋酸的量,可直接影響蘇木素的著色能力和清晰度。
加少了,會造成核漿共染,背景不干凈;加多了,核著色能力下降。此液可放置3月至半年左右,視氣溫而定。使用期要看染色的切片量來定:以每天100張片的量,可使用半個月左右。 其實不及著用的話,不加氧化汞也行。待蘇木素自然氧化。[室溫不同,氧化的時間也不同,一般需要三個月左右,用前過濾加冰醋酸。這種方法用的時間比較長]
(2)Gill改良蘇木素液蘇木精 2 g 無水酒精 250 ml硫酸鋁 17.6 g 蒸餾水 750 ml碘酸鈉 0.2 g 冰醋酸 20 ml
先將蘇木精溶于無水酒精,硫酸鋁溶于蒸餾水,然后兩液混合后加入碘酸鈉,最后加入冰醋酸。此液為半氧化蘇木素液,不會產生沉淀,氧化膜少。是進行性染色的配方,不用分化,染色時間在4-10分鐘左右,效果很好。特別適用于染色機染色。
二、伊紅
(1)伊紅(水溶性)
配方:伊紅 (水溶性) 2.5-5 g 蒸餾水 500 ml
將水溶性伊紅溶于蒸餾水中,然后加濃鹽酸10毫升,充分攪拌,靜置過夜后過濾。過濾后的沉淀用蒸餾水沖洗二次,再過濾;將沉淀物連同濾紙一起放入溫箱內干燥,加95%酒精1000毫升,配成飽和液。使用前再用95%的酒精 1:1~2倍稀釋,加入1~2%冰醋酸。此方法具有染色時間快,顏色鮮艷,不容易褪色,使用壽命長等特點。
(2)伊紅(醇溶性)
配方:伊紅 (醇溶性) 2.5-5g 75%酒精 1000 ml加幾滴冰醋酸至半透明狀。
三、 固定液
(1)12%中性福爾馬林(pH7.0)甲醛 120 ml NaH2PO4?H2O 4 g Na2HPO4 13 g 蒸餾水 880 ml
(2)12%酸性福爾馬林(PH 4.5)甲醛 120 ml水 830 ml冰醋酸 50 ml
(3)12%福爾馬林甲醛 120 ml水 880 ml
(4) Bouin 固定液飽和苦味酸 75 ml甲醛 25 ml冰醋酸 5 ml
四、鹽酸酒精分化液
濃鹽酸 0.5~1 ml 75%酒精 99 ml
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