應對食品中大腸桿菌超標的的新檢測方法
大腸桿菌含量竟超標 290 倍?食品安全問題不容忽視。據測評博主"老爸評測”發布的檢測報告,紫燕百味雞的夫妻肺片和香辣鴨脖等產品被檢出大腸菌群嚴重超標,其中最高超標達 290 倍。大腸桿菌作為一種條件致病菌,在特定條件下可能引發人和多種動物的胃腸道感染等疾病。大腸桿菌(Escherichia coli,簡稱E. coli)是一種常見的革蘭氏陰性細菌,廣泛存在于人類和動物的腸道中。盡管大多數大腸桿菌菌株是無害的,但某些致病菌株可以引起嚴重的食源性疾病。水產養殖業中,貝類如貽貝(mussels)常常受到大腸桿菌污染,導致食品安全問題。因此,快速、準確地檢測和定量大腸桿菌對于保障食品安全至關重要。
2024年在《Aquaculture》期刊上題為《Rapid, DNA extraction-free, detection and quantification of Escherichia coli in mussels by Most Probable Number colorimetric Loop-mediated isothermal amplification》的研究開發了一種無需DNA提取的快速檢測和定量貽貝中大腸桿菌的方法。該方法結合了最可能數(Most Probable Number,MPN)和比色環介導等溫擴增(colorimetric Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技術,能夠在短時間內提供準確的檢測結果。
圖源:https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2024.741873
研究具體所用的方法
1、樣品準備:從市場上購買新鮮貽貝,取其軟體部分進行均質化處理,制備樣品懸液。
2、MPN法:將樣品懸液進行系列稀釋,每個稀釋度的樣品分別接種到含有選擇性培養基的試管中,培養24小時后觀察并記錄陽性反應的試管數目。
3、LAMP法:從陽性反應的試管中取樣,直接進行LAMP反應。LAMP反應體系中加入比色指示劑,通過顏色變化判斷反應結果。整個過程無需進行DNA提取,簡化了操作步驟。
4 、數據分析:根據MPN法的統計原理,結合LAMP法的檢測結果,計算樣品中大腸桿菌的濃度。
研究的結論:研究結果表明,結合MPN和LAMP技術的方法能夠在短時間內(約2小時)準確檢測和定量貽貝中的大腸桿菌。該方法具有操作簡便、靈敏度高、特異性強等優點,適用于現場快速檢測。與傳統的培養法相比,該方法顯著縮短了檢測時間,提高了檢測效率。
啟發
本研究為水產養殖業中大腸桿菌的快速檢測提供了一種新的思路和方法。其他科研者可以借鑒這種結合MPN和LAMP技術的方法,應用于其他類型的食品安全檢測中。此外,該方法的無DNA提取步驟也為簡化其他微生物檢測提供了參考。
對于非本領域的科研工作者,本研究展示了如何通過創新的技術組合,解決實際問題。讀者可以從中了解到比色LAMP技術的原理和應用,以及如何通過簡化操作步驟,提高檢測效率。這種跨學科的研究方法和思維方式,對于推動科學研究和技術應用具有重要意義。
參考文獻:https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2024.741873