一種新的用于快速病毒定量的轉基因Sf9細胞系
在醫藥行業中，昆蟲細胞系經常用于生產重組蛋白，其生產過程需要對重組昆蟲病毒進行遺傳工程操作。重組病毒可以根據病毒量化過程用于實驗中。然而，目前的病毒定量方法受技術和經驗要求，持續時間長且復雜。Kyu-Seek Kim等人為解決這一問題，設計了一種可用于快速和便捷地量化昆蟲病毒的新型轉基因Sf9細胞系。
Sf9-QE細胞系
Sf9-QE細胞系通過引入熒光基因，能夠在病毒感染后迅速發出高熒光，從而簡化了病毒量化過程。與傳統的昆蟲細胞系相比，使用Sf9-QE細胞系可以將病毒量化的時間縮短4至6天。該細胞系的平均直徑約為16微米，比普通Sf9細胞小2微米，但其增殖速率卻是普通Sf9細胞的1.6倍。研究還發現，Sf9-QE細胞系在至少100次傳代后仍能保持其特性，表明其穩定性相對較高。此外，熒光光度法也方便了病毒感染的定量。
Kyu-Seek Kim等人在文章中還詳細描述了Sf9-QE細胞系的構建過程，包括使用piggyBac系統將目標基因片段轉化到Sf9細胞基因組中，以及通過抗生素篩選和多次傳代來選擇表達EGFP（增強型綠色熒光蛋白）的轉基因細胞系。此外，研究還評估了Sf9-QE細胞系在病毒感染后的熒光強度，并與其他細胞系進行了比較。
如圖1所示，比較了20株Sf9-T細胞株對病毒感染的熒光表達水平。結果顯示，在所有Sf9-T細胞系中，包括作為對照的Sf9-ET，在每過3天就能觀察到清晰的熒光表達。值得注意的是，Sf9-T-20細胞在每過1天就能觀察到熒光表達，并在4天達到最大值，此時熒光強度大約是Sf9-ET細胞的5倍。因此，選擇熒光最快速、最強烈的Sf9-T-20細胞系作為最終的轉基因細胞系，命名為Sf9-QE（“QE”代表quick and easy）。
關鍵發現：
— 使用piggyBac系統將目標基因片段轉化到Sf9細胞基因組；
— 通過抗生素篩選和多次傳代來選擇表達EGFP（增強型綠色熒光蛋白）的轉基因細胞系；
— 通過引入熒光基因，能夠在病毒感染后迅速發出高熒光，從而簡化病毒定量過程。
結論：總的來說，Sf9-QE細胞系的開發為醫學和制藥行業中重組蛋白的生產和研究提供了一個有用的工具，有望顯著提高病毒量化的效率和準確性，從而對人類健康和醫療保健做出貢獻。
引用文獻：Kyu-Seek Kim, Jun-Su Bae, Hyuk-Jin Moon, Do-Young Kim, Soo-Dong Woo. A Novel Transgenic Sf9 Cell Line for Quick and Easy Virus Quantification[J].Insects,2024,Vol.15(9): 686。
