高壓處理后通過PMAxx-RT-qPCR技術測定牡蠣中人類諾如病毒的滅活
本文將探討如何運用PMAxx-RT-qPCR技術評估高壓處理對牡蠣中人諾如病毒的滅活效果。
PMAxx-RT-qPCR:病毒檢測的革新利器
PMAxx-RT-qPCR技術是一種先進的病毒檢測方法,它通過結合光誘導交聯劑PMAxx與實時定量PCR技術,實現了對活病毒與死病毒的精準區分。在檢測過程中,PMAxx能夠特異性結合死細胞中的DNA,從而在PCR擴增前消除其干擾,確保了檢測結果的準確性。
高壓處理:滅活病毒的新途徑
高壓處理,即通過施加極高的壓力(通常為400-600MPa)于食品上,能夠在不破壞食品營養價值和口感的前提下,有效滅活其中的細菌、病毒等微生物。針對牡蠣中的人諾如病毒,高壓處理的滅活效果尤為顯著,為食品安全提供了新的保障。
實驗設計與數據分析
在這項研究中,研究人員使用PMAxx?(一種光反應性DNA結合染料)處理,結合RT-qPCR技術,來評估高壓處理后牡蠣中諾如病毒基因組I和II群(GI和GII)的病毒衣殼完整性。研究使用了生物積累的諾如病毒GI.3和GII.4牡蠣,將它們暴露于300和450 MPa的壓力下,在15℃和20℃的溫度條件下進行處理。然后,使用RT-qPCR和PMAxx-RT-qPCR對樣本進行分析。通過計算RT-qPCR測定的諾如病毒濃度(基因組拷貝數/克消化組織)與PMAxx-RT-qPCR濃度的比值,得出相對非完整(Relative Non-Intact, RNI)比率。RNI比率值反映了非完整(非感染性)病毒與完整(可能感染性)病毒的數量關系。
研究發現,隨著壓力的增加和溫度的降低,RNI比率值增加,表明病毒完整性降低。在300 MPa的壓力下,GI型諾如病毒的中位數RNI比率值在15℃時為2.6,而在20℃時為1.1。在450 MPa的壓力下,15℃時的RNI比率值為5.5,而在20℃時為1.3。在600 MPa的壓力下,20℃時的RNI比率值為5.1。對于GII型諾如病毒,RT-qPCR和PMAxx-RT-qPCR的檢測在450和600 MPa的壓力下顯著降低。
結果與討論
實驗結果顯示,經過高壓處理的牡蠣,其人諾如病毒含量下降了至少3個對數級,這意味著高壓處理能夠顯著降低牡蠣攜帶人諾如病毒的風險。這一發現不僅為牡蠣等貝類食品的病毒污染控制提供了新的解決方案,也為高壓處理技術在食品加工領域的應用提供了強有力的科學支持。
結語:科技助力食品安全
PMAxx-RT-qPCR技術在高壓處理牡蠣滅活人諾如病毒中的應用,展現了科技在食品安全領域的巨大潛力,為食品安全領域帶來了革命性的突破。這一研究不僅為食品加工提供了新的視角,也為消費者健康保駕護航提供了有力的科學依據。通過精準檢測與有效滅活,我們能夠更好地保障消費者健康,推動食品行業的持續健康發展。未來,隨著科技的不斷進步,我們有理由相信,食品安全將得到更加全面和有效的保障。
參考文獻:Rachmadi A T, Gyawali P, Summers G, et al. PMAxx-RT-qPCR to Determine Human Norovirus Inactivation Following High-Pressure Processing of Oysters[J]. Food and Environmental Virology, 2024: 1-9.