銅綠假單胞菌的免疫學檢測現代技術進展
銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa, PA)作為一種常見的機會致病菌,在醫療、環境及公共衛生領域均構成顯著威脅。免疫學檢測作為其中一類高效手段,通過特異性抗體與細菌抗原的相互作用,為銅綠假單胞菌的識別與診斷提供了有力支持。
在免疫學檢測中,多種技術被應用于銅綠假單胞菌的檢測,其中最為常見和成熟的是酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。ELISA技術利用酶的高效催化作用,將抗原抗體反應與酶促反應相結合,通過顯色反應直觀地反映出樣本中目標物質的含量,包括:雙抗夾心法、雙位點一步法、間接法。這種技術不僅操作簡便、結果可靠,而且具有較高的靈敏度和特異性,能夠準確識別出微量的銅綠假單胞菌抗原或抗體。除了ELISA外,免疫熒光技術、免疫印跡法以及流式細胞術等也被用于銅綠假單胞菌的免疫學檢測。免疫熒光法是將用熒光素釋放劑或染色劑標記的抗體或抗原分子與細菌的特異性蛋白結合,通過光譜分析器檢測出熒光,從而完成檢測和細胞定位。酶聯免疫電轉移印斑法是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法,該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。流式細胞術則結合了免疫學和細胞學的優勢,能夠實現對PA的快速、高通量檢測。1988年,Shand等制備了PA標準抗原(St-Ag),并用IBT和交叉免疫電泳法(CIE)檢測CF患者血清中的PA抗體,可用于診斷PA引起CF患者的肺部感染。PA的毒力因子、鞭毛抗原、脂多糖都可以作為抗原進行檢測。1988年,George等提取一種針對所有PA的鼠類單抗,并與異硫氰酸熒光素偶聯,分別檢測了21份陽性樣品和103份陰性樣品,對PA達到了100%的敏感性和特異性,可以用于血培養中PA的快速鑒定。近些年來,熒光量子點、納米團簇、熒光稀土配合物等,具有高熒光效率、持久熒光特性的納米材料的發展為IFA帶來了新的方向。
銅綠假單胞菌免疫學檢測的優勢在于其高特異性、高靈敏度以及快速性。它能夠在較短時間內提供準確的檢測結果,為臨床診斷和治療提供有力支持。同時,該方法還適用于大規模篩查和流行病學調查,有助于及時發現和控制銅綠假單胞菌的傳播。
原文DOI: 10.1039/c7ra09064a.
來源:微生物安全與健康網,作者~鄭曉崢。