醫院環境中重要菌株耐藥型檢測
耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(Methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci, CoNS)是醫院環境中的重要問題。MRSA和CoNS一直是導致衛生保健相關感染的前五大病原體。在一些機構中，25%至50%的金黃色葡萄球菌和高達75%的金黃色葡萄球菌分離株對甲氧西林（Methicillin）或苯唑西林（Oxacillin）耐藥。這些分離株對目前所有可用的β-內酰胺抗菌劑以及β-內酰胺/β-內酰胺酶抑制劑組合（β-lactam antimicrobials and β-lactam/β-lactamase inhibitor combinations）具有耐藥性，但一些具有抗MRSA活性的新頭孢菌素（Cephalosporins）除外。因此，萬古霉素（Vancomycin）常被用作葡萄球菌感染的經驗性治療。因此，正確檢測這些分離株的耐藥性對治療管理至關重要。頭孢西?。–efoxitin）可用于篩選葡萄球菌mecA介導的耐藥，并且由于提高了檢測mecA介導的耐藥的敏感性和特異性，常被用作苯唑西林在金黃色葡萄球菌（S. aureus）、盧頓葡萄球菌（S. lugdunensis）、表皮葡萄球菌（S. epidermidis）和其他一些葡萄球菌中的替代品。值得注意的是，苯唑西林圓盤試驗（Oxacillin disk testing）只對指定的品種是可靠的，不應該用于金黃色葡萄球菌。然而，對于某些葡萄球菌物種，如假中間葡萄球菌（S. pseudintermedius），苯唑西林是耐藥性最可靠的預測因子。除了傳統的表型抑制測試（Traditional phenotypic inhibitory testing）外，還有其他幾種常規方法用于檢測和區分分離細菌和臨床標本中MRSA的存在。顯色培養基（Chromogenic media），比如在MRSA的情況下，選擇頭孢西丁耐藥菌株并根據菌落的存在和顏色將金黃色葡萄球菌與其他物種區分開來，經常用于MRSA監測。當從無菌地點分離出肺炎鏈球菌（S. pneumoniae）時，必須進行藥敏試驗。可采用oxacillin篩片擴散法（Oxacillin screen disk diffusion method），分離物抑菌區≥20 mm，說明該分離物對青霉素（Penicillin）敏感。此外，在Penicillin篩檢上小于19mm的區域需要使用MIC方法進行額外的測試，因為這種大小的區域抑制可能出現在對青霉素耐藥、敏感或中間的分離株中。因此，當從某一來源(如腦膜炎、血液)獲得分離物時，延遲藥敏試驗可能有潛在危險，直接進行MIC檢測可能是最有效的。最低抑菌濃度(The minimum inhibitory concentration，MIC)定義為抗生素在體外抑制生物體可見生長的最低濃度。對于肺炎鏈球菌或腸球菌以外的鏈球菌，需要檢測和報告的抗菌劑取決于種類。只有當患者對青霉素過敏并考慮用大環內酯類藥物/利可沙胺治療時才需要進行檢測，因為B群鏈球菌引起的感染已顯示對克林霉素（Clindamycin）有40%的耐藥性，對紅霉素（Erythromycin）有50%的耐藥性。對紅霉素耐藥但對克林霉素敏感的分離株應檢測由erm基因介導的克林霉素“誘導性”耐藥，使用微量肉湯稀釋（Broth microdilution or the ）或D區近似試驗（D-zone approximation test）。只報告克林霉素的結果。
“誘導型”克林霉素耐藥也可發生在葡萄球菌、β溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌中。不同地理區域的患病率可能不同。對于綠鏈球菌（viridans streptococci），任何從無菌身體部位分離出來并涉及嚴重感染(如心內膜炎或敗血癥)的分離株，都應檢測青霉素或氨芐西林（Ampicillin）的敏感性。青霉素和氨芐西林擴散試驗的解釋標準不適用于翠綠鏈球菌，因為該方法是不可靠的病原體-抗菌藥物組合。因此，使用MIC方法輔助完成測試。翠綠鏈球菌是重要的致病菌，可引起中性粒細胞減少癥和先天性瓣膜心內膜炎患者的膿毒癥。
表型法——包括肉湯稀釋（Broth dilution）、瓊脂稀釋（Agar dilution）、圓盤擴散（Disk diffusion）和梯度擴散（Gradient diffusion）——是目前最普遍的，在許多情況下也是最經濟有效的完成藥敏試驗的方法。基于表型方法的商業操作系統減少了檢測抗生素耐藥性表達所需的勞動和時間，并在許多實驗室中使用。最后，更新的檢測方法，如分子檢測，其中一些可以直接在患者標本上進行，由于它們消除了與病原體分離相關的延遲，已與常規檢測相結合。
Figure 1. Disk induction （derived from McPherson, R. A., & Pincus, M. R. 2021）
參考文獻：McPherson, R. A., & Pincus, M. R. (2021). Henry's clinical diagnosis and management by laboratory methods E-book. Elsevier Health Sciences.
來源：微生物安全與健康網，作者~蘇悅
