SDS-PAGE，蛋白轉(zhuǎn)印，western Blot試劑配制
1.5 mol/L Tris (PH8.8)
1．稱量181.7g Tris置于1L燒杯中。
2．加入約800 ml去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?/span>
3．用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至8.8。
4．定容至1L.
5．高壓滅菌后，室溫保存
注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1oC，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。
（參照kara公司Catalog-N1）
1 mol/L Tris (PH6.8)
1．稱量121.1g Tris置于1L燒杯中。
2．加入約800 ml去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?/span>
3．按下表量加入濃鹽酸調(diào)節(jié)所需的pH值。
pH值 濃HCl
6.8
7.4 約70 ml
7.6 約60 ml
8.0 約42 ml
4．定容至1L.
5．高壓滅菌后，室溫保存。
注意：1.溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1oC，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。2. 如1 mol/L溶液呈現(xiàn)黃色，應(yīng)予丟棄，并置備質(zhì)量更好的Tris。
（參照kara公司Catalog-N1）
30％丙稀酰胺（100ml）
1．稱量下列試劑置于燒杯中。
丙烯酰胺（Acrylamide） 29 g
雙丙烯酰胺 (BIS) 1 g
2．加入約60 ml去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?/span>
3．定容至100 ml, 用0.45 μm濾膜濾去雜質(zhì)。
4．于棕色瓶中4 oC保存。
注意：1. 丙烯酰胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性，并可通過皮膚吸收，其作用具有積累性，配制時(shí)應(yīng)戴手套等。聚丙烯酰胺無毒，但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作，因?yàn)橛锌赡芎猩倭康奈淳酆铣煞帧?/span>
（參照kara公司Catalog-N1和《分子克隆》二版P924）
30％ SDS
1．稱量10 g 高純度（電泳級）的SDS置于100~200 ml燒杯中。
2．加入約800 ml去離子水，68oC加熱溶解。
3．滴加數(shù)滴濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.2。
4．定容至100 ml，室溫保存。
（參照kara公司Catalog-N1和《分子克隆》二版P924）
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