SDS-PAGE,蛋白轉印,western Blot試劑配制
1.5 mol/L Tris (PH8.8)
1.稱量181.7g Tris置于1L燒杯中。
2.加入約800 ml去離子水,充分攪拌溶解。
3.用濃鹽酸調節pH值至8.8。
4.定容至1L.
5.高壓滅菌后,室溫保存
注意:應使溶液冷卻至室溫后再調定pH值,因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1oC,溶液的pH值大約降低0.03個單位。
(參照kara公司Catalog-N1)
1 mol/L Tris (PH6.8)
1.稱量121.1g Tris置于1L燒杯中。
2.加入約800 ml去離子水,充分攪拌溶解。
3.按下表量加入濃鹽酸調節所需的pH值。
pH值 濃HCl
6.8
7.4 約70 ml
7.6 約60 ml
8.0 約42 ml
4.定容至1L.
5.高壓滅菌后,室溫保存。
注意:1.溶液冷卻至室溫后再調定pH值,因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1oC,溶液的pH值大約降低0.03個單位。2. 如1 mol/L溶液呈現黃色,應予丟棄,并置備質量更好的Tris。
(參照kara公司Catalog-N1)
30%丙稀酰胺(100ml)
1.稱量下列試劑置于燒杯中。
丙烯酰胺(Acrylamide) 29 g
雙丙烯酰胺 (BIS) 1 g
2.加入約60 ml去離子水,充分攪拌溶解。
3.定容至100 ml, 用0.45 μm濾膜濾去雜質。
4.于棕色瓶中4 oC保存。
注意:1. 丙烯酰胺具有很強的神經毒性,并可通過皮膚吸收,其作用具有積累性,配制時應戴手套等。聚丙烯酰胺無毒,但也應謹慎操作,因為有可能含有少量的未聚合成分。
(參照kara公司Catalog-N1和《分子克隆》二版P924)
30% SDS
1.稱量10 g 高純度(電泳級)的SDS置于100~200 ml燒杯中。
2.加入約800 ml去離子水,68oC加熱溶解。
3.滴加數滴濃鹽酸調節pH值至7.2。
4.定容至100 ml,室溫保存。
(參照kara公司Catalog-N1和《分子克隆》二版P924)
北京天優??瞪锟萍加邢薰?/span>
服務熱線:400-860-6160
聯系電話/微信:13718308763
QQ:2136615612 3317607072
E-mail:Tianyoubzwz@163.com