用EMB培養基培養大腸桿菌時,菌落為什么呈現黑色?
問題提出:用EMB培養基培養大腸桿菌時,菌落為什么呈現黑色?
問題解析:EMB培養基,又稱伊紅美藍培養基,是一種特別設計用于鑒別和分離特定腸道菌群,特別是大腸菌群的鑒別性培養基。它的主要特點是含有兩種染料——酸性染料伊紅和堿性染料美藍,以及能夠支持細菌生長的基礎成分。
EMB培養基的主要成分包括:
1. 蛋白胨 - 提供氮源、維生素和氨基酸,促進細菌生長。
2. 乳糖 - 是一種碳源,大腸菌群可以利用乳糖進行發酵,產酸。
3. 磷酸氫二鉀 - 作為緩沖劑,維持培養基的pH穩定。
4. 瓊脂 - 作為凝固劑,制成固體培養基以便菌落的形成和計數。
5. 伊紅和美藍 - 這兩種染料在不同菌種的作用下會產生不同的顏色反應,用于菌落的鑒別。
使用原理:
1.當大腸桿菌或其他一些革蘭氏陰性腸道菌在EMB培養基上生長并發酵乳糖產酸時,它們周圍的環境變為酸性。
2.酸性環境下,伊紅會被菌體吸附并被還原,然后與美藍結合,使菌落呈現紫黑色,并伴有綠色金屬光澤。
3.其他不能發酵乳糖的細菌或發酵能力較弱的菌種在該培養基上的顏色反應則不同,例如沙門氏菌形成無色菌落,金黃色葡萄球菌一般情況下不生長或生長極差。
因此,通過觀察在EMB培養基上形成的菌落的顏色、形狀和光澤等特點,實驗室工作人員可以快速地對樣品中的大腸菌群和其他腸道菌進行初步的鑒別。這對于水質檢測、食品安全檢測以及臨床診斷等領域有著重要的應用價值。