什么是平皿快速檢測(cè)法
平皿快速檢測(cè)法是利用菌體在特定固體培養(yǎng)基平板上的生理生化反應(yīng)，將肉眼觀察不到的產(chǎn)量性狀轉(zhuǎn)化成可見(jiàn)的“形態(tài)”變化。具體的有紙片培養(yǎng)顯色法、變色圈法、透明圈法、生長(zhǎng)圈法和抑制圈法等，這些方法較粗放，一般只能定性或半定量用，常只用于菌種初篩，可以大大提高篩選的效率，缺點(diǎn)是由于培養(yǎng)平皿上的種種條件與搖瓶培養(yǎng)，尤其是發(fā)酵罐深層液體培養(yǎng)時(shí)的條件有很大的差別，有時(shí)會(huì)造成兩者的結(jié)果不一致。
平皿快速檢測(cè)法操作時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)的菌體充分分散，形成單菌落，以避免多菌落混雜一起，引起“形態(tài)”大小測(cè)定的偏差。
(1)紙片培養(yǎng)顯色法 將飽浸含某種指示劑的固體培養(yǎng)基的濾紙片擱于培養(yǎng)皿中，用牛津杯架空，下放小團(tuán)浸有3%甘油的脫脂棉以保濕，將待篩選的菌懸液稀釋后接種到濾紙上，保溫培養(yǎng)形成分散的單菌落，菌落周圍將會(huì)產(chǎn)生對(duì)應(yīng)的顏色變化。從指示劑變色圈與菌落直徑之比可以了解菌株的相對(duì)產(chǎn)量性狀。指示劑可以是酸堿指示劑也可以是能與特定產(chǎn)物反應(yīng)產(chǎn)生顏色的化合物。
(2)變色圈法 將指示劑直接摻入固體培養(yǎng)基中，進(jìn)行待篩選菌懸液的單菌落培養(yǎng)，或噴灑在已培養(yǎng)成分散單菌落的固體培養(yǎng)基表面，在菌落周圍形成變色圈。如在含淀粉的平皿中涂布一定濃度的產(chǎn)淀粉酶菌株的菌懸液，使其呈單菌落，然后噴上稀碘液，發(fā)生顯色反應(yīng)。變色圈越大，說(shuō)明菌落產(chǎn)酶的能力越強(qiáng)。而從變色圈的顏色又可粗略判斷水解產(chǎn)物的情況。
(3)透明圈法 在固體培養(yǎng)基中滲入溶解性差、可被特定菌利用的營(yíng)養(yǎng)成分，造成渾濁、不透明的培養(yǎng)基背景。在待篩選菌落周圍就會(huì)形成透明圈，透明圈的大小反映了菌落利用此物質(zhì)的能力。
在培養(yǎng)基中摻入可溶性淀粉、酪素或 CaCO3可以分別用于檢測(cè)菌株產(chǎn)淀粉酶、產(chǎn)蛋白酶或產(chǎn)酸能力的大小。
(4)生長(zhǎng)圈法 利用一些有特別營(yíng)養(yǎng)要求的微生物作為工具菌，若待分離的菌在缺乏上述營(yíng)養(yǎng)物的條件下，能合成該營(yíng)養(yǎng)物，或能分泌酶將該營(yíng)養(yǎng)物的前體轉(zhuǎn)化成營(yíng)養(yǎng)物，那么在這些菌的周圍就會(huì)有工具菌生長(zhǎng)，形成環(huán)繞菌落生長(zhǎng)的生長(zhǎng)圈。
該法常用來(lái)選育氨基酸、核苷酸和維生素的生產(chǎn)菌。工具菌往往都是對(duì)應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株。
(5)抑制圈法 待篩選的菌株能分泌產(chǎn)生某些能抑制工具菌生長(zhǎng)的物質(zhì)，或能分泌某種酶并將無(wú)毒的物質(zhì)水解成對(duì)工具菌有毒的物質(zhì)，從而在該菌落周圍形成工具菌不能生長(zhǎng)的抑菌圈。該法常用于抗生素產(chǎn)生菌的篩選，工具菌常是抗生素敏感菌。由于抗生素分泌處于微生物生長(zhǎng)后期，取出瓊脂塊可以避免各菌落所產(chǎn)生抗生素的相互干擾。典型的例子是春雷霉素生產(chǎn)菌的篩選。
