血糖的測(cè)定及激素對(duì)血糖濃度的影響
I . 鄰甲苯胺法（O-T法）
【基本原理】
葡萄糖的醛基與鄰甲苯胺在熱醋酸溶液中縮合成葡萄糖基胺，再脫水生成希夫氏（Schiff）堿，然后經(jīng)分子重排，生成一組藍(lán)綠色化合物，在630nm處有一吸收峰，吸光度大小與血糖濃度成正比。
【器材】
水浴箱、 試管、分光光度計(jì)。
【 試劑 】
1．鄰甲苯胺 試劑 取冰醋酸（AR）940ml,加入硫脲（AR）1.5g，溶解后加入鄰甲苯胺60 ml混勻，置棕色瓶中，室溫保存。新配試劑應(yīng)放置24小時(shí)后（待老化）使用。此試劑腐蝕性極強(qiáng)，應(yīng)避免與皮膚接觸而造成灼傷。
2．12mmol/L苯甲酸溶液 稱取苯甲酸1.4g，加入蒸餾水900ml,加熱助溶，冷卻后加蒸餾水至1000ml。
3．葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)貯存液（100mmol/L） 準(zhǔn)確稱取無水葡萄糖（預(yù)先置80℃烤箱中干燥至恒重，移置干燥器中保存）1.802g,用12mmol/L苯甲酸溶液溶解，移至100ml容量瓶中，再以12mmol/L苯甲酸溶液稀釋至刻度，搖勻，移入棕色瓶中，冰箱內(nèi)保存。
4．葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液（5mmol/L）準(zhǔn)確吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)貯存液5.0ml，置于100ml容量瓶中，再以12mmol/L苯甲酸溶液稀釋至刻度。
【操作步驟】
混勻，置沸 水浴 中煮沸12分鐘，取出置流水中冷卻5分鐘用分光光度計(jì)波長(zhǎng)630nm，以空白調(diào)零，讀取各管吸光度。
[注]
1．鄰甲苯胺與葡萄糖的反應(yīng)并非特異 ，其他糖在反應(yīng)中亦能產(chǎn)生與葡萄糖相似的吸收光譜，它們的相對(duì)吸光度比率分別為：葡萄糖=1.00;果糖=0.06;甘露糖=0.96;半乳糖=1.42;蔗糖=0.16。但這些糖中只有葡萄糖、果糖、半乳糖存在于正常人血清中，而后兩者在正常人血液中含量甚微，不影響試劑測(cè)定結(jié)果。
2．葡萄糖與鄰甲苯胺的呈色強(qiáng)度與反應(yīng)條件（鄰甲苯胺和冰醋酸的批號(hào)、試劑配制后保存的時(shí)間以及加熱溫度和時(shí)間）有關(guān)。因此，各管的反應(yīng)條件必須完全一致。
3．鄰甲苯胺為淺黃色油狀液體，易被氧化成紅棕色，用此種鄰甲苯胺配制的試劑、空白管顏色深，反應(yīng)靈敏度低，嚴(yán)重影響測(cè)定結(jié)果。須經(jīng)以下方法處理方可應(yīng)用：在500ml鄰甲苯胺中加入鹽酸羥胺0.5g,置50～60℃ 水浴 中20分鐘并不時(shí)搖動(dòng)，使鄰甲苯胺還原，顏色變淺。如上述處理不夠理想，則將鄰甲苯胺用全玻璃 蒸餾 器重 蒸餾 ，收集199～201℃無色或淺黃色的流出液，置棕色瓶加黑紙袋避光密封保存。
II. 胰島素和腎上腺素對(duì)血糖濃度的影響
【基本原理】
人和動(dòng)物體內(nèi)，血糖濃度受各種激素調(diào)節(jié)而維持恒定。胰島素能降低血糖；其他很多激素則具有升高血糖的作用，其中以腎上腺素作用較為迅速而明顯。胰島素促進(jìn)肝臟和肌肉將葡萄糖合成糖元，又加強(qiáng)糖的氧化作用，故可以降低血糖；腎上腺素促進(jìn)肝糖元分解而增高血糖。
此實(shí)驗(yàn)觀察家兔注射胰島素和腎上腺素前后的血糖濃度變化。
【器材】
注射器 、針頭、刀片、 分光光度計(jì) 。
【試劑】
1．腎上腺素和胰島素
2．草酸鈉
3．25%葡萄糖
【基本操作】
1．動(dòng)物準(zhǔn)備
取正常家兔兩只，實(shí)驗(yàn)前預(yù)先饑餓，稱體重（一般為2～3kg）。
2．取血
一般多以耳緣靜脈取血，先去毛，用二甲苯擦拭兔耳，使其血管充血，再用干棉球擦干，于放血部位涂一薄層凡士林，再用粗針頭刺破靜脈放血，將血液收入抗凝管中（每ml血約需2mg草酸鈉）邊收集邊搖勻，以防凝固。用干棉球壓迫血管止血。
3．注射激素后取血
取餓兔血后，其中一只兔皮下注射胰島素，劑量按0.75單位/公斤體重計(jì)算，并記錄注射時(shí)間。一小時(shí)后再取血。取血后立即腹腔或皮下注射25%葡萄糖液10ml，以免家兔發(fā)生胰島素性休克而死亡。
另一只兔皮下注射腎上腺素，劑量按0.4mg/公斤體重計(jì)算，并記錄注射時(shí)間。半小時(shí)后再取血。
[計(jì)算]
算出注射胰島素后血糖降低和注射腎上腺素后血糖增高的百分率。
測(cè)血糖常用化學(xué)法有鄰甲苯酚法,常用酶法為葡萄糖氧化酶法、己糖 激酶 法。
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