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分子生物學實驗室常用儀器及使用方法
發布日期:2022-07-28 08:51:10


分子生物學實驗室常用儀器及使用方法


事實證明,在科學飛速發展的今天,無論從事哪個領域的研究,要想突破,除了有良好的理論基礎外,更重要的是依賴于先進的技術和優良的儀器設備以及良好的研究環境。一個標準的分子生物學實驗室除了具有一般生物學實驗室的常規儀器設備外,還具有一些特殊用途的儀器,這些儀器一般較精密,價格昂貴。下面介紹這些儀器的使用方法和注意事項。


一、冷凍離心機


低溫分離技術是分子生物學研究中必不可少的手段。基因片段的分離、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物樣品的分離制備實驗中都離不開低溫離心技術,因此低溫冷凍離心機成為分子生物學研究中必備的重要儀器。


在國內,有多個廠家生產冷凍離心機,本實驗室的高速冷凍離心機為GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。配有角式轉頭:6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。極限轉速20000rpm。


1. 安裝與調試


離心機應放置在水平堅固的地面上,應至少距離10cm以上且具有良好的通風環境中,周圍空氣應呈中性,且無導電性灰塵、易燃氣體和腐蝕性氣體,環境溫度應在0~30℃之間,相對濕度小于80%。試轉前應先打開蓋門,用手盤動轉軸,輕巧靈活,無異?,F象方可上所用的轉頭。

轉子準確到位后打開電源開關,然后用手按住門開關,再按運轉鍵,轉動后立即停止,并觀察轉軸的轉向,若逆時針旋轉即為正確,機器可投入使用。


2. 操作程序


(1)插上電源,待機指示燈亮;打開電源開關,調速與定時系統的數碼管顯示的閃爍數字為機器工作轉速的出廠設定,溫控系統的數碼管顯示此時離心腔的溫度。


(2)設定機器的工作參數,如工作溫度,運轉時間,工作轉速等。


(3)將預先平衡好的樣品放置于轉頭樣品架上,關閉機蓋。


(4)按控制面板的運轉鍵,離心機開始運轉。在預先設定的加速時間內,其運速升 至預先設定的值。


(5)在預先設定的運轉時間內(不包括減速時間),離心機開始減速,其轉速在預先設定的減速時間內降至零。


(6)按控制面板上的停止鍵,數碼管顯示dedT,數秒鐘后即顯示閃爍的轉速值,這時機器已準備好下一次工作。


3. 注意事項


(1)離心機應始終處于水平位置,外接電源系統的電壓要匹配,并要求有良好的接地線,機器不使用,要拔掉電源插頭。


(2)開機前應檢查轉頭安裝是否牢固,機腔中有無異物掉入。


(3)樣品應預先平衡,使用離心筒離心時離心筒與樣品應同時平衡。


(4)揮發性或腐蝕性液體離心時,應使用帶蓋的離心管,并確保液體不外漏以免腐蝕機腔或造成事故。


(5)除工作溫度、運轉速度和運轉時間外,不要隨意更改機器的工作參數,以免影響機器性能。轉速設定不得超過最高轉速,以確保機器安全運轉。


(6)使用中如出現0.00或其它數字,機器不運轉,應關機斷電,10秒鐘后重新開機,待所設轉速顯示后,再按運轉鍵,機器將照常運轉。


(7)不得在機器運轉過程中或轉子未停穩的情況下打開蓋門,以免發生事故。


(8)每次操作完畢應做好使用情況記錄,并定期對機器各項性能進行檢修。


二、電泳儀


電泳技術是分子生物學研究不可缺少的重要手段。電泳一般分為自由界面電泳和區帶電泳大類,自由界面電泳不需支持物,如等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類電泳目前已很少使用。


區帶電泳需用各種類型的物質作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠?DG薄層等,分子生物學實驗中最常用的是瓊脂糖凝膠電泳。


應用電泳法可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組份分析或單個組份提取制備。下面以DYY-12型電腦三恒多用電泳儀(北京六一儀器廠)為例介紹其使用方法。


1. 使用方法


(1)按電源開關,顯示屏出現“歡迎使用DYY-12型電腦三恒多用電泳儀…”等字樣后,同時系統初始化,蜂鳴4聲,設置常設置。屏幕轉成參數設置狀態,見圖一:


U : 0V U= 100V | Mode: STD

I: 0mA I = 50mA |

P : 0W P= 50W |

T: 00:00 T= 01:00 |


其中:左側大寫 U: I: P: T: 為電泳時實際值;中間部分顯示程序的常設值(預置值)。Mode(模式):STD(標準);TIME(定時);VH(伏時);STEP(分步)


(2)設置工作程序。用鍵盤輸入新的工作程序。例如,要求工作電壓U=1000V,電流I限制在200mA以內,功率W限制在100W以內,時間T為3小時20分,并且到時間自動關掉輸出。則操作步驟如下:


①按“模式”鍵,將工作模式由標準(STD)轉為定時(TIME)


模式。每按一下模式鍵,其工作方式按下列順序改變: STD?TIME?VH?STEP?STD。


②先設置電壓U,按“選擇”鍵,先將其反顯,然后輸入數字鍵即可設置該參數的數值。按數字1000,則電壓即設置完成。


③設置電流I,按“選擇”鍵,先使I反顯,然后輸入數字200。


④設置功率P,按“選擇”鍵,先使P反顯,然后輸入數字100。


⑤設置時間T,按“選擇”鍵,先使T反顯,然后輸入數字320。如果輸入錯誤,可以按“清除”鍵,再重新輸入。


⑥確認各參數無誤后,按“啟動”鍵,啟動電泳儀輸出程序。在顯示屏狀態欄中顯示Start! 并蜂鳴4聲,提醒操作者電泳儀將輸出高電壓,注意安全。之后逐漸將輸出電壓加至設置值。同時在狀態欄中顯示“Run”,并有兩個不斷閃爍的高壓符號,表示端口已有電壓輸出。在狀態欄最下方,顯示實際的工作時間(精確到秒)。


⑦每次啟動輸出時,儀器自動將此時的設置數值存入“MO”號存儲單元。以后需要調用時可以按“讀取”鍵,再按“0”鍵,按“確定”鍵,即可將上次設置的工作程序取出執行。


⑧電泳結束,儀器顯示:“END”,并連續蜂鳴提醒。此時按任一鍵可止鳴





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