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中國(guó)微生物菌種

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常用HE試劑配制
發(fā)布日期:2022-09-15 13:42:23


常用HE試劑配制


一、蘇木素


(1) Harris蘇木素:


配方:
蘇木素 1 g 無(wú)水乙醇 10 ml
蒸餾水 200 ml 鉀明礬 20 g 
HgO 0.5 g


先將蘇木素溶于無(wú)水乙醇中,備用。把明礬放入蒸餾水,加熱溶解,再加入備用的蘇木素,煮沸 2 分鐘,先加入少量的氧化汞,防止氧化過(guò)程中蘇木素外溢,玻棒攪拌,然后,邊攪拌邊加入氧化汞。加完后,立即移至冰水中,加速其冷卻,靜置一夜后,過(guò)濾。

用前以 5% 的比例加入冰醋酸。如配好后時(shí)間較長(zhǎng),冰醋酸的量可適當(dāng)多加一點(diǎn)。冰醋酸的量,可直接影響蘇木素的著色能力和清晰度。加少了,會(huì)造成核漿共染,背景不干凈;加多了,核著色能力下降。此液可放置3月至半年左右,視氣溫而定。

使用期要看染色的切片量來(lái)定:以每天100張片的量,可使用半個(gè)月左右。 其實(shí)不及著用的話(huà),不加氧化汞也行。待蘇木素自然氧化。[室溫不同,氧化的時(shí)間也不同,一般需要三個(gè)月左右,用前過(guò)濾加冰醋酸。這種方法用的時(shí)間比較長(zhǎng)]


(2)Gill改良蘇木素液

蘇木精 2 g 無(wú)水酒精 250 ml
硫酸鋁 17.6 g 蒸餾水 750 ml
碘酸鈉 0.2 g 冰醋酸 20 ml


先將蘇木精溶于無(wú)水酒精,硫酸鋁溶于蒸餾水,然后兩液混合后加入碘酸鈉,最后加入冰醋酸。此液為半氧化蘇木素液,不會(huì)產(chǎn)生沉淀,氧化膜少。是進(jìn)行性染色的配方,不用分化,染色時(shí)間在4-10分鐘左右,效果很好。特別適用于染色機(jī)染色。


二、伊紅


(1)伊紅(水溶性)


配方:
伊紅 (水溶性) 2.5-5 g 
蒸餾水 500 ml


將水溶性伊紅溶于蒸餾水中,然后加濃鹽酸10毫升,充分?jǐn)嚢瑁o置過(guò)夜后過(guò)濾。過(guò)濾后的沉淀用蒸餾水沖洗二次,再過(guò)濾;將沉淀物連同濾紙一起放入溫箱內(nèi)干燥,加95%酒精1000毫升,配成飽和液。使用前再用95%的酒精 1:1~2倍稀釋?zhuān)尤?~2%冰醋酸。
此方法具有染色時(shí)間快,顏色鮮艷,不容易褪色,使用壽命長(zhǎng)等特點(diǎn)。


(2)伊紅(醇溶性)


配方:
伊紅 (醇溶性) 2.5-5g 
75%酒精 1000 ml
加幾滴冰醋酸至半透明狀。


三、 固定液


(1)12%中性福爾馬林(pH7.0)
甲醛 120 ml 
NaH2PO4?H2O 4 g 
Na2HPO4 13 g 
蒸餾水 880 ml


(2)12%酸性福爾馬林(PH 4.5)
甲醛 120 ml
水 830 ml
冰醋酸 50 ml


(3)12%福爾馬林
甲醛 120 ml
水 880 ml


(4) Bouin 固定液
飽和苦味酸 75 ml
甲醛 25 ml
冰醋酸 5 ml


四、鹽酸酒精分化液

濃鹽酸        0.5~1 ml

75%酒精         99 ml



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