基因表達(dá)系列分析(SAGE)
基因表達(dá)系列分析(SAGE)是通過快速和詳細(xì)分析成千上萬個EST(express sequenced tags)來尋找出表達(dá)豐富度不同的SAGE標(biāo)簽序列。再次訪法中,通過限制性酶切可以產(chǎn)生非常短cDNA(10-14bp)標(biāo)簽,并通過PCR擴(kuò)增和連接,隨后對連接題進(jìn)行測序。SAGE大大簡化和加快了3’端表達(dá)序列標(biāo)簽的收集和測序。同DD一樣,SAGE是一個“開放”的系統(tǒng),可以發(fā)現(xiàn)新的未知的序列。在進(jìn)行標(biāo)本的比較之前,SAGE在cDNA的產(chǎn)生和處理上需要較多個步驟。由于SAGE是一個依賴DNA測序的基因計量方法,它對基因表達(dá)的測定比DD更加量化。由于需要進(jìn)行大量的測序反應(yīng),所以費用因素使大多數(shù)研究機構(gòu)對其廣泛應(yīng)用的主要限制
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