細胞膜滲透性實驗原理與操作步驟

本實驗以雞血為材料，將紅細胞放置到不同的溶質溶液中，通過引起紅細胞溶血時間不同，初步了解不同溶質進入細胞膜 的速度情況，具體步驟如下：

一、實驗目的：

了解細胞膜的滲透性及各類物質進入細胞的速度。

二、實驗原理：

將紅細胞放入數種等滲溶液中，由于紅細胞對各種溶質的透性不同，有的溶質可以滲入，滲入的溶質能夠提高紅細胞的滲透壓，所以促使水分進入細胞，引起溶血。由于溶質透入速度互不相同，因此溶血時間也不相同。

三、實驗用品：

1. 器材：

試管，試管架，載玻片，蓋玻片，顯微鏡，吸管，離心機 。

2. 試劑：

0.85%NaCl溶液，0.085%NaCl溶液，0.8mol/L甲醇，0.8mol/L丙三醇，0.6%葡萄糖溶液，2% Triton X-100。

3. 材料：

雞血。

四、實驗步驟：

1. 取雞血2~3mL，加0.85%NaCl溶液4mL，在1000r/min條件下離心5min。(紅細胞壓積量不少于0.3mL，否則應補加雞血)

2. 將上述離心的紅細胞按沉淀量配成50%濃度。(總體積量應不少于0.6mL)

3. 取6支試管，分別加入如下溶液各3mL

① 0.85%NaCl溶液;②0.085%NaCl溶液;③0.32mol/L甲醇;④0.32mol/L丙三醇;⑤6%葡萄糖溶液;⑥10% Triton X-100。

4. 向上述6支試管中分別加入50%紅細胞懸液1滴，輕松混勻，觀察個試管是否有溶血現象發生(觀察時間1h)，記錄溶血時間并于顯微鏡下觀察溶液中細胞。

五、實驗結果：

1. 雞血紅細胞在不同溶液下的溶血現象。

表1 雞血紅細胞在不同溶液下的溶血現象

1. 對于溶血較快的試管，用顯微鏡觀察時要注意滴加血液后立即鏡檢，否則將會因為細胞溶血太快而看不到細胞。

2. 即使細胞在等滲溶液中短時間內未發生溶血現象，但是細胞長時間處于等滲溶液中也會發生溶血現象。

3. 發生溶血的細胞從形態上看，膜結構上有一個個口，膜還是有結構的，但是細胞比正常細胞小。

注意事項：溶血較快的溶質，一定要掌握鏡檢時間;雖然是等滲溶液中，但由于細胞中某一物質離子數高于細胞，部分物質還是要進入細胞，最好發生溶血現象。