Hanks液的配制方法步驟及其注意事項
Hanks 液是生物醫學實驗中極為常用的無機鹽溶液和平衡鹽溶液(Balanced Salt Solutions,簡稱 BSS)之一,簡稱HBSS。主要用途是用于配制培養液,稀釋劑以及細胞清洗液,但是不能單獨作為細胞/組織培養液。本詳細表述了Hanks 液平衡鹽溶液的配制方法和步驟。
原液A | &NBS p; | &NBS p; |
&NBS p; | NaCl | 160g |
&NBS p; | MgSO4 ·7H2 O | 2g |
&NBS p; | KCl | 8g |
Mg Cl2 ·6H2 O | 2g | |
CaCl2 | 2.8g | |
溶于1000ml雙蒸水 | ||
原液 B | ||
(1) | Na2 HPO4 ·12H2 O | 3.04g |
KH2 PO4 | 1.2g | |
葡萄糖 | 20.0g | |
溶于800ml雙蒸水 | ||
(2) | 0.4%酚紅溶液:取酚紅0.4g,置玻璃研缽中,逐滴加入0.1N NaOH,并研磨,直至完全溶解,約加0.1N NaOH 10ml。將溶解的酚紅吸入100ml量瓶中,用雙蒸水洗下研缽中殘留酚紅液,并入量瓶中,最后補加雙蒸水至100ml。 | |
將(1)液和(2)液混合,補加雙蒸水至1000ml,即為原液B。 | ||
應用液 | ||
原液A | 1份 | |
原液B | 1份 | |
雙蒸水 | 18份 | |
混合后,分裝于200ml小瓶中,10磅高壓蒸氣滅菌15分鐘,臨用前用無菌的5.6% NaHCO3 調pH至7.2~7.6 | ||
注意事項:
酚紅對細胞有一定的毒性,可根據自己的實驗選擇一定的量,酚紅所加的用量不一樣,溶液的顏色也會有少許變化。此外配制hanks液所用的試劑必須達到一級GR或者二級AR規格。


