RTCA技術(shù)在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用（一） ——RTCA實時監(jiān)測腫瘤細胞遷移及浸潤

細胞的遷移和浸潤不僅是細胞進行重要生理活動的基礎(chǔ)，同時也在炎癥反應(yīng)和腫瘤發(fā)生發(fā)展等病理過程中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。細胞遷移及浸潤是腫瘤細胞的主要特性之一，因此其也成為目前細胞生物學(xué)研究的熱點。

目前對細胞遷移及浸潤研究的檢測方法通常是建立在標(biāo)記基礎(chǔ)上的終點檢測法，其中一種最常用的檢測方法為Boyden Chamber法，又稱Transwell技術(shù)，通過將細胞加入上孔室，在下孔室加入血清或其他趨化因子誘導(dǎo)細胞遷移到下室。利用染色人工計數(shù)遷移細胞數(shù)目用于評估細胞的遷移。該法無法滿足動態(tài)同步監(jiān)控，人為計數(shù)誤差較大，重復(fù)率低。同時，該法費時費力，也制約了實驗的通量。

針對以上方法存在的缺陷和科研工作者們對細胞遷移及浸潤檢測的需求，艾森生物開發(fā)的xCELLigence RTCA DP實時無標(biāo)記細胞功能分析儀是基于Boyden Chamber原理的細胞阻抗檢測系統(tǒng)。

RTCA DP對腫瘤細胞遷移及浸潤的檢測，用到了獨特的上下兩層孔板設(shè)計，將金微電極陣列整合到了上層板的背面，實驗過程中，當(dāng)穿膜后的細胞在背面的電極陣列上貼壁生長，就產(chǎn)生了相應(yīng)的阻抗，反映到儀器上就有了觀察遷移浸潤的細胞指數(shù)曲線，即可實現(xiàn)實時、動態(tài)、定量的細胞遷移及浸潤動力學(xué)檢測。

RTCA技術(shù)具有無需標(biāo)記、實驗步驟簡單、省時省力，結(jié)果客觀和重復(fù)性好的特點，同時還可根據(jù)研究者的實驗需要，應(yīng)用配套的E-plate檢測板對細胞增殖、粘附及共培養(yǎng)等進行同步檢測。

RTCA DP實時無標(biāo)記細胞功能分析儀用于細胞遷移及浸潤實驗，可實時動態(tài)的檢測小分子化合物、藥物，microRNA，以及基因調(diào)控作用等對腫瘤細胞遷移及浸潤的影響。在不進行外源性標(biāo)記的情況下，即可快速準(zhǔn)確獲得實驗數(shù)據(jù)，極大的減少了實驗的勞動量，增加了實驗的通量，提高了實驗的可操作性和重復(fù)性。

同時，能夠直觀的反映小分子化合物、藥物，以及microRNA等對細胞遷移及浸潤影響的時間量效作用，為實驗優(yōu)化和相關(guān)實驗的開展提供科學(xué)依據(jù)。此外，RTCA DP實時無標(biāo)記細胞功能分析儀還可實現(xiàn)對細胞增殖、粘附及毒性等方面的實時檢測，從而可進一步證實細胞遷移及浸潤能力的改變與細胞增殖、粘附等的相互關(guān)系。

因此，基于微電子阻抗傳感技術(shù)的RTCA DP實時無標(biāo)記細胞功能分析儀具有無需標(biāo)記、實時、動態(tài)、定量及自動化等諸多優(yōu)勢，可作為體外檢測細胞遷移、浸潤、增殖等的優(yōu)選系統(tǒng)。