抑郁癥的體外模型

抑郁等精神疾患的發生可能與過量GC對海馬的選擇性損傷有關,但機理不明,Heuser和Cosi等報道可能是由于高濃度GC導致神經營養因子表達水平降低造成的,而抗抑郁劑不僅使GC受體上調,HPA軸反饋恢復正常,而且使神經營養因子表達升高,達到治療目的.PC12細胞株為大鼠嗜鉻細胞克隆化細胞株,分化的PC12細胞有典型的神經細胞特征,其胞膜上GC受體表達豐富[6].本文根據文獻方法以高濃度皮質酮(corticosterone)模擬抑郁及焦慮癥神經細胞損傷狀態
實驗操作(MTT法測定細胞存活力)
嗜鉻細胞瘤株PC12細胞.用含5%胎牛血清及5%馬血清的DMEM培養基(含青霉素鈉200kU.L-1,鏈霉素100mg.L-1pH7.4)調細胞密度為2x108L-1接種于預先用多聚賴氨酸(0.1g.L-1)處理過的96孔培養板,每孔10LL,放入CO2孵箱,培養3~4d,待細胞長滿孔底后即可用于實驗.參照文獻方法,稍加修改,吸去細胞液換上含有相應濃度藥物及0.2mmol.L-1皮質酮的無血清DMEM(對照組不含任何藥品),培養48h,吸去培養液,用D2Hanks液洗2遍,每孔加入含0.5g#L-1MTT的無血清DMEM培養4h后吸去培養液,每孔加入10%十二烷基硫酸鈉100LL,待藍色顆粒完全溶解(約12~16h),用多孔掃描分光光度計測定標本在570nm波長處的吸光度(A570nm)值,用于定量反映活細胞數.