真核生物DNA復制的特點
DNA復制的研究最初是在原核生物中進行的,有些原核生物的DNA復制已經搞得很清楚。真核生物比原核生物復雜得多,但DNA復制的基本過程還是相似的。在這里我們主要討論一些重要的區別。
1.與原核生物不同,真核生物DNA復制有許多起始點,例如 酵母 S.cerevisiae的17號染色體約有400個起始點,因此,雖然真核生物DNA復制的速度(60核苷酸/每秒鐘)比原核生物DNA復制的速度(E.coli 1700核苷酸/每秒鐘)慢得多,但復制完全部 基因組 DNA也只要幾分鐘的時間。
2.SV40病毒DNA主要依靠宿主細胞中的DNA復制體系進行DNA的復制,這是了解真核生物DNA復制的體外模型。在真核生物DNA復制叉處,需要兩種不同的酶。DNA聚合酶α(polα)和DNA聚合酶δ(polδ)。polα和引物酶緊密結合,在DNA模板上先合成RNA引物,再由polα延長DNA鏈,這種活性還要復制因子C參與。同時結合在引物模板上的PCNA(增殖細胞核抗原Proliferating cell nuclear antigen)此時釋放了polα,然后由polδ結合到生長鏈3′末端,并與PCNA結合,繼續合成前導鏈。而隨從鏈的合成靠polα緊密與引物酶結合并在復制因子C幫助下,合成崗崎片段。
3.由于真核生物染色體是線性DNA,它的兩端叫做端區(telomeres),端區是由重復的寡核苷酸序列構成的。例如 酵母 的端區重復序列是5′G(1?)T(3)3′。前面講到所有生物DNA聚合酶都只能催化DNA從5′→3′的方向合成,因此當復制叉到達線性染色體末端時,前導鏈可以連續合成到頭,而由于隨從鏈是以一種不連續的形式合成崗崎片段,所以不能完成線性染色體末端的復制,如果這個問題不解決,真核生物在細胞分裂時DNA復制將產生5′末端隱縮,使DNA縮短,近十多年的研究表明,真核生物體內都存在一種特殊的反轉錄酶叫做 端粒 酶(telomerase),它是由蛋白質和RNA兩部分組成的,它以自身的RNA為模板,在隨從鏈模板DNA的3′ H末端延長DNA,再以這種延長的DNA為模板,繼續合成隨從鏈(圖16-16)。
由此可見端粒酶在保證染色體復制的完整性上有重要意義。
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